共振光散射技术对生物及药物分子含量的测定及研究

来源 :长春师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lu_bo_123
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上世纪九十年代,Pasternack等人利用了共振光散射技术(Resonance LightScattering,简称RLS)对生物及药物分子的含量进行了测定。该方法具有灵敏度高、仪器简单、选择性好、探针种类丰富等优点,目前广泛的应用于分析化学、物理化学、超分子科学及生物科学等领域。因此,RLS测定的新方法及RLS探针已成为分析科研人员在努力寻找研究目标。目前,RLS探针有很多种,被广泛使用的有金属配合物、有机染料、表面活性剂、金纳米粒子等。表面活性剂是具有双亲结构的一类有机化合物,通过静电引力与其他物质结合。金纳米粒子因其具有特殊的物理化学性质,可以以共价键与含有巯基的药物结合或通过静电引力与其他物质结合,形成尺寸较大的粒子,从而引起共振光散射强度增加。本文利用不同的RLS探针,对几种药物及鲑鱼精DNA含量的测定进行了详细的研究,主要内容如下:提出了一种高灵敏度测定中药有效成分杨梅苷的新方法。pH9.5时,溴化十六烷基吡啶(CPB)可以明显使杨梅苷RLS信号增强,该方法的检测限为16.3ng mL-1。详细研究了该体系的最佳实验条件。在468nm处,一定浓度范围内的杨梅苷与RLS增加值有良好的线性关系。采用该方法对合成样品进行了分析,结果满意。利用种子生长法合成了金纳米粒子。pH7.4时,金纳米粒子可以使6-巯基嘌呤RLS信号明显增强。该体系的RLS增加值与6-巯基嘌呤浓度(0.0681-1.702μgmL-1)呈良好的线性关系。线性回归方程为IRLS=9.31+82.42C (C, μg mL-1),r=0.9948。检出限为3.32ng mL-1。采用该方法对合成样品进行了分析,结果满意。提出一种高灵敏度测定昔美酸沙美特罗的新方法。金纳米粒子使昔美酸沙美特罗在357nm处的RLS强度显著增加。昔美酸沙美特罗通过静电引力与金纳米粒子结合。在最佳实验条件下,体系的RLS强度增加值与昔美酸沙美特罗浓度(0.054-6.038μg mL-1)呈良好的线性关系。线性回归方程为IRLS=75.95+7.86C(C, μg mL-1),r=0.9928。检出限为9.48ng mL-1。使用该方法分析了合成样品,结果满意。实验研究了杨梅苷-CPB-DNA体系的共振光散射光谱并讨论了测定DNA合成样品的最佳条件。pH7.4时,杨梅苷-CPB可以提高468nm处的DNA共振光散射强度。体系增强的RLS信号与DNA浓度在0.076-4.2μg mL-1范围内成正比。线性回归方程IRLS6.7729.53C(C,μg mL-1),r=0.9944,检出限为4.1ng mL-1。使用该方法分析了合成样品,结果满意。利用共振光散射探针杨梅素和CTMAB测定痕量DNA的新方法。实验研究了杨梅素-CTMAB-DNA体系的最佳实验条件。体系增强的RLS信号与DNA浓度在0.076-4.2μg mL-1范围内成正比。检出限为3.04ng mL-1。使用该方法分析了合成样品,结果满意。提出一种以CPC-茶多酚为探针测定微量DNA的共振光散射光谱法。在最佳实验条件下,CPC-茶多酚可以明显提高294nm处DNA的RLS强度。体系的RLS信号增强值与DNA在0.015-3.2μg mL-1浓度范围内呈良好的线性关系,线性回归方程为IRLS=52.42+51.98C (C, μg mL-1), r=0.9964,检出限为1.49ngmL-1。使用该方法对三个DNA合成样品分析测定,实验结果满意。
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