【摘 要】
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目的 蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)属丝氨酸和苏氨酸蛋白激酶,于1991年由三个研究组分别同时发现,其中两个研究组发现它的催化域与蛋白激酶C(PKC)和蛋白激酶A(PKA)分
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目的 蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)属丝氨酸和苏氨酸蛋白激酶,于1991年由三个研究组分别同时发现,其中两个研究组发现它的催化域与蛋白激酶C(PKC)和蛋白激酶A(PKA)分别有73%和68%的相同,故将其命名为PKB(protein kinase B)和RAC-PK(related to the A and C kinases);同时,另一研究组发现它是T细胞性淋巴瘤逆转录病毒癌基因v-akt的产物,故称其为Akt;它为一个近58kD的蛋白,其最重要的作用是抗细胞凋亡作用,这种作用与肿瘤的发生、发展有着密切关系。涎腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)是最常见的涎腺恶性肿瘤之一,是涎腺恶性肿瘤中居第一或第二位的肿瘤。它的生物学特性为生长较为缓慢,但侵袭性强,常沿神经、血管生长,易复发和转移。 目前有关涎腺腺样囊性癌增殖、分化、侵袭和转移等生物学特性的机制尚不十分清楚,临床上缺少有效的治疗药物。本实验应用免疫组织化学方法检测涎腺腺样囊性癌组织中PKB及其上游抑癌基因PTEN的表达,分析两者之间的相关性;应用Western-blot和RT-PCR方法对体外培养的涎腺腺样囊性癌SACC-83、SACC-LM细胞中PKB的蛋白表达和转录水平的变化及其阻断剂LY294002的作用进行了初步研究;并应用透射电镜技术、MTT方法和流式细胞术在体外研究LY294002对SACC-83细胞生长、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨PKB与涎腺腺样囊性癌发生发展的关系,为深入研究涎腺腺样囊性癌的发病机理和临床上更有效的治疗涎腺腺样囊性癌提供新的思路。 实验材料与方法 1.免疫组织化学方法:
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