棉花轮纹斑病及其拮抗细菌的筛选和鉴定

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wang525659571
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棉花轮纹斑病是棉花叶部病害中分布最广、危害最大、流行频率很高的一种毁灭性病害。近年来,轮纹斑病上升为一种重要病害,在我国主要棉区都有发生,早发、重发田块减产30%~50%,造成重大的经济损失。本研究对棉花轮纹斑病田间发病规律、病原菌鉴定、生物学特性及其拮抗细菌的筛选与鉴定进行了系统研究,为病害诊断和预测预报提供理论依据,为轮纹斑病的生物防治奠定基础,具有重要的现实意义。通过2010年在廊坊实验基地进行的不同品种棉花轮纹斑病田间发病调查,结果表明,不同品种棉花轮纹斑病的发病严重程度存在一定差异,棉花品种对轮纹斑病的抗性存在差异。田间消长动态表现为:子叶期即开始出现,进入8月份后,病害发生加快,8月6日至9月6日病害迅速发展,9月26日病情指数达到最高峰,病害的发生具有普发性、爆发性的特点。从我国4个省,2个直辖市和1个自治区采集的棉花病叶组织中共分离到链格孢(Alternaria spp.)17个菌株,通过用离体接种涂抹法进行了病原菌致病性测定,结果表明,17个菌株均为轮纹斑病的致病菌。通过形态学观察和分子生物学方法对分离的17株病原菌菌株进行鉴定,结果表明,A1、A2、A4、A5、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A16、A15、A17、A21这16个菌株为链格孢菌(Alternaria alternata),A3为大孢链格孢菌(Alternaria macrospore)。对棉花轮纹斑病菌菌株A1的生物学特性进行研究,结果表明,营养条件、光照、温度、湿度、不同棉花品种叶片研磨液等环境条件对分生孢子萌发有显著影响。采用平板对峙培养法,对本实验室已初步筛选出的10株拮抗细菌进行再次筛选,结果表明,10株拮抗细菌的抑菌率均在50%以上,其中jk5的抑菌率最高,达到了78.1%,抑菌半径可达到15.8 mm,通过多次试验其抑菌效果稳定并具有较广的抗菌谱。在光镜下观察,拮抗细菌jk5对病原菌分生孢子、菌丝均有抑制和破坏作用,被抑制的病原菌分生孢子、菌丝生长畸形。对拮抗细菌jk5进行室内防效试验,结果表明,jk5对NJ0712、宁4-14和中植棉2号这三个品种的轮纹斑病均有较好的防效,防效分别为66.94%、77.12%、81.82%。田间防效试验结果显示,喷施拮抗细菌jk5发酵液的病情指数要低于对照组,jk5对田间病害发生具有一定的防治作用。通过形态特征的观察、生理生化指标测定和16S rDNA分子生物学方法对jk5菌株进行鉴定,确定拮抗细菌jk5为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
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