水平离心式逆流色谱在药物分析中的应用研究

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逆流色谱(Counter-current Chromatography)作为一种液液分配色谱技术,广泛应用于天然产物的分离制备中。其中作为当代逆流色谱技术的螺线管型逆流色谱(HCC)和水平离心式逆流色谱(CCC)以其高固定相保留,高分离速度,分离便捷等优点近年来得到了广泛应用。CCC技术在国内尚属起步阶段,研究较少,因此将CCC技术开创性的应用于药品检验当中将具有重要意义。葡萄糖酸氯己定软膏,为抗菌消毒防腐药。现行质量标准对样品提取后以紫外分光光度法进行含量测定,该方法操作繁琐,具有较大的系统误差,且残留的乳膏基质具有较强的本底吸收,对紫外吸收波长及紫外吸收强度均产生干扰,最终影响检测结果;阿昔洛韦乳膏为嘌呤核苷类抗病毒药,克霉唑乳膏为广谱抗真菌药。两者的现行质量标准对主成分提取后均以高效液相色谱法进行含量测定,方法操作繁琐,具有较大的系统误差,且残留的乳膏基质在检测过程中干扰高效液相色谱系统,对色谱柱造成不可逆损伤,最终影响检测结果。水杨酸软膏,为角质软化剂。现行质量标准对样品溶解后以容量法进行含量测定,该方法具有较大的系统误差,且软膏基质在检验过程中干扰指示剂变色,最终影响检测结果;本文采用CCC法,实现了对四种软膏有效成分的含量测定分析,并系统研究了溶剂体系、溶剂物理参数、进样量、样品溶媒、样品前处理对固定相保留值、色谱峰峰型、基线稳定性、定量结果的影响。结果显示,在以正己烷-乙腈-水(2:1:1,V/V/V)为溶剂体系,5%吐温80的水溶液为进样溶媒,进样体积为1.0m1的分析条件下,四种软膏的主成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性实验数据的RSD均小于2.0。由此可见,该方法不仅操作简便,结果准确,而且与文献报道的软膏类HPLC法相比,具有方法学上特定的优势,设备耐用性好,检验周期短,该方法对软膏类药品的主成分分离与定量分析具有一定的指导意义。参照单组份软膏类样品的CCC分析方法,推广应用至多组份的复方制剂去痛片的CCC分离与分析。最终确定以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(4:5:8:10, V/V/V/V)为溶剂体系,甲醇-水(8:10,V/V)为进样溶媒,进样体积为1.0ml的分析条件。通过离心逆流色谱技术对去痛片四种主成分进行分析定量,线性范围内四种组份的标准曲线呈良好的线性关系,平均加样回收率均在98.0%-102.0%。该分析方法能够一次性快速简便的定量去痛片四种主成分的含量,丰富了去痛片含量测定的分析方法,促进了CCC在药品检验中的应用。
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