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恶性肿瘤是严重危害人类健康和生命的重大疾病，近年来以研究中药有效成分为突破口，开发新型的抗肿瘤药物，成为肿瘤治疗领域的研究热点。已有研究表明，原花青素不仅可以抑制多种肿瘤细胞的生长，诱导多种肿瘤细胞凋亡，而且可以拮抗化疗药物对正常细胞的毒性作用。原花青素在抗肿瘤治疗方面有具大的潜力，目前抗肿瘤的机制研究主要集中在前列腺癌方面，对肝细胞癌的抑制作用及其机制研究较少，所以需要对其进行研究。 目的： 本研究旨在研究原花青素对肝癌HepG2细胞的抑制作用，并对其可能的作用机制进行探讨，从而为临床应用原花青素治疗肝癌提供实验依据。 方法： 1.改良MTT法（WST-8法）及克隆形成抑制实验观察原花青素对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用。 2.碘化丙锭（PI）单染色检测细胞周期改变，Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平。 3.激光共聚焦显微镜观察和Western blot检测细胞自噬发生。 结果： 1.改良MTT法（WST-8法）检测发现：原花青素作用HepG2细胞后，与对照组相比，不同浓度的原花青素对肝癌细胞的生长均有抑制作用，且随原花青素浓度增加，抑制作用逐渐增强（P<0.01），原花青素作用于人肝癌HepG2细胞48 h的IC50为130.4 mg/L。 2.克隆形成抑制实验结果表明：随着原花青素作用于HepG2细胞的药物浓度的增加，细胞克隆逐渐减少，与对照组比有明显差异。 3.流式细胞仪PI单染结果显示，原花青素作用于人肝癌HepG2细胞后，随着浓度的增加，Gl期细胞比例增加，S期比例明显减少，G2/M期比例基本消失。表明原花青素能将人肝癌 HepG2细胞周期阻滞在 Gl期，且高浓度原花青素组出现明显的亚二倍体峰，说明原花青素通过诱导细胞凋亡抑制细胞的生长。0、40、80、120、160、200 mg/L的原花青素作用48 h对HepG2细胞的凋亡指数（亚二倍体百分率）分别为2.6%、5.8%、21.1%、39.6%、81.0%。 4. Annexin V-FITC/PI双染结果显示，原花青素作用后，早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞及坏死细胞、自噬性死亡和非特异性死亡细胞群均增加，且晚期凋亡和坏死细胞的增加呈剂量效应关系。提示原花青素可能是通过凋亡性死亡、自噬性死亡、坏死性死亡的方式抑制细胞生长。 5．激光共聚焦显微镜观察，经原花青素处理并转染 GFP-LC3质粒的HepG2细胞胞浆内，LC3呈现明显的点状聚集；Control组绿色荧光呈弥散分布。 6. Western blot免疫印迹分析发现，细胞自噬标志蛋白LC3-II的蛋白表达水平随着原花青素浓度增加逐渐增多，说明原花青素是通过自噬性死亡的方式抑制细胞生长，诱导细胞死亡。 结论： 1.原花青素可抑制人肝癌HepG2细胞的存活率，并呈剂量效应关系。 2.原花青素明显改变人肝癌HepG2细胞的细胞周期，阻滞细胞于Gl期。 3.原花青素通过诱导细胞凋亡抑制人肝癌细胞的生长。 4.原花青素也通过自噬性死亡的方式抑制人肝癌细胞的生长。