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目的:本文通过临床研究,评价疏肝健脾活血方治疗肝郁脾虚型功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)的疗效及安全性;通过动物实验研究,探讨其对肝郁脾虚型FD模型大鼠脑肠肽的调节作用,阐明其可能的作用机制。为临床应用疏肝健脾活血方治疗肝郁脾虚型FD提供实验依据。方法:文献研究:从中国知网(CNKI)数据库和Pubmed数据库下载近年发表的与功能性消化不良相关的文献进行分析并做综述。临床研究:将2016年1月-2016年12月在广州中医药大学第一附属医院脾胃病科门诊符合纳入标准的肝郁脾虚型FD患者70例,按随机数字表法随机分为治疗组和对照组各35例。治疗组给予疏肝健脾活血方治疗,对照组给予多潘立酮治疗,两组疗程均为4周。从治疗前后患者中医证候积分、生存质量、精神心理状态改善角度评价其临床疗效,从肝肾功能等评价其安全性。动物实验研究:70只SPF级雌性SD大鼠按体质量随机抽取10只作为正常组,其余60只采用"慢性束缚+过度疲劳+饮食失节"复合因素法造模21d,造模成功后,按体质量随机分为模型组、疏肝健脾活血方高剂量组、疏肝健脾活血方中剂量组、疏肝健脾活血方低剂量组、柴芍六君子汤组、多潘立酮组,加上正常组,共7组。分组后,疏肝健脾活血方高、中、低剂量组、柴芍六君子汤组及多潘立酮组大鼠灌胃给予相应药物干预14d,正常组和模型组大鼠灌胃给予相应体积纯净水。给药剂量按大鼠体表面积换算。实验期间观察大鼠毛发、大便等生活状态并记录大鼠的食量及体重。给药干预结束后,进行小肠推进实验评价其促进胃肠运动作用,采ELISA法检测大鼠血浆Ghrelin、胃动素(motilin,MTL)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)、血管活性肠肽(Vasoactive Intestinal Peptide,VIP)、胃泌素(gastrin,GAS)、降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)及胃窦组织诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase,iNOS)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、P物质(substanceP,SP)含量,采用免疫组化法检测大鼠下丘脑瘦素长型受体(OB-R1)和胆囊收缩素受体(CCKAR)的蛋白表达,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑iNOS、5-HT、SP、OB-R1、CCKAR基因表达。结果:文献综述了功能性消化不良的中医病因病机及辨证论治,现代医学的发病机制及治疗手段,动物模型制备及中医药防治功能性消化不良作用机制等方面的研究进展。一、临床研究结果1.两组患者性别、年龄及病程比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。2.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD中医证候疗效与治疗前比较,治疗组患者上腹部疼痛、上腹灼烧感、早饱感、餐后饱胀不适、食少纳差、疲乏无力、大便稀溏、嗳气吞酸、两胁胀痛、急躁易怒或情绪低落等症状均得到显著改善,差异有统计学意义(P<0.05),恶心欲吐症状有改善的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);对照组患者上腹部疼痛、上腹灼烧感、早饱感、餐后饱胀不适、食少纳差、疲乏无力、大便稀溏、嗳气吞酸、恶心欲吐等症状得到明显改善(P<0.05),两胁胀痛、急躁易怒或情绪低落等症状有改善的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,治疗组患者上腹部疼痛、上腹灼烧感、餐后饱胀不适、食少纳差、两胁胀痛、急躁易怒或情绪低落等症状改善程度明显优于对照组(P<0.05)。结果表明疏肝健脾活血方具有改善FD患者临床症状的功效。3.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD总有效率分析治疗4周后,治疗组临床痊愈12例、显效14例、有效4例、无效4例,总有效率达88.24%;对照组临床痊愈6例、显效8例、有效10例,无效9例,总有效率为72.73%。治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD患者生存质量的影响与治疗前比较,治疗组患者生理职能、躯体疼痛、总体健康、精力、精神健康维度积分均明显增加(P<0.05),生理机能、社会功能、情感职能维度积分有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);对照组患者生理职能维度积分明显增加(P<0.05),生理机能、躯体疼痛、总体健康、精力、情感职能、精神健康维度积分有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,治疗组患者生理职能、躯体疼痛、总体健康、精神健康维度积分增加显著优于对照组(P<0.05)。结果表明疏肝健脾活血方能够提高患者生存质量。5.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD患者精神心理状态的影响与治疗前比较,治疗组患者HAMA和HAMD的总分值均显著下降,差异有统计学意义(P<O.05),表明疏肝健脾活血方具有改善患者精神心理状态的作用;对照组患者HAMA和HAMD的总分值略呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。6.疏肝健脾活血方治疗后复发率治疗后,疏肝健脾活血方组的复发率为26.47%,低于多潘立酮组的48.48%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。7.疏肝健脾活血方安全性患者在治疗过程中均未出现异常情况及不良反应,提示疏肝健脾活血方安全性较好。二.动物实验研究结果1.模型评价根据造模前后大鼠毛发、大便、食量、体重等变化情况,可知肝郁脾虚型FD大鼠造模成功。2.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD大鼠胃肠运动的影响与正常组比较,模型组大鼠胃肠蠕动显著减少,小肠推进率非常显著降低(P<0.01)。给药干预14d后,疏肝健脾活血方高剂量组、中剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子组大鼠胃肠蠕动明显增加,小肠推进率非常显著增加(P<0.01),疏肝健脾活血方低剂量组大鼠小肠推进率显著增加(P<0.05)。结果表明疏肝健脾活血方能够增加肝郁脾虚型FD大鼠胃肠蠕动,且呈一定的量效关系。3.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD大鼠血浆Ghrelin、MTL、CCK、VIP、GAS、CGRP的影响与正常组比较,模型组大鼠血浆Ghrelin、MTL、GAS含量显著减少(P<0.05),CCK、VIP和CGRP含量明显增加(P<0.05)。给药干预14d后,疏肝健脾活血方各剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子组大鼠血浆Ghrelin和MTL含量显著增加(P<0.05),疏肝健脾活血方高剂量组大鼠血浆GAS含量显著增加(P<0.05),其余各组大鼠血浆GAS含量有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);疏肝健脾活血方各剂量组及多潘立酮组大鼠血浆CCK含量非常显著降低(P<0.01),柴芍六君子汤组大鼠血浆CCK含量显著降低(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组、中剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子汤组大鼠血浆VIP含量显著降低(P<0.05);疏肝健脾活血方各剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子汤组大鼠血浆CGRP含量显著降低(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组大鼠血浆CCK含量显著低于柴芍六君子汤组(P<0.05)。结果表明疏肝健脾活血方具有调节肝郁脾虚型FD大鼠Ghrelin、MTL、CCK、VIP、GAS、CGRP的作用,活血中药能够增强疏肝健脾药抑制CCK分泌的作用。4.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD大鼠胃窦组织iNOS、5-HT、SP蛋白表达的影响与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织iNOS和SP蛋白表达显著增加(P<0.05),胃窦组织5-HT蛋白表达显著下调(P<0.05)。给药干预14d后,疏肝健脾活血方各剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子组大鼠胃窦组织iNOS蛋白表达显著下调(P<0.05);疏肝健脾活血方中剂量组及低剂量组大鼠胃窦组织5-HT蛋白表达非常显著上调(P<0.01),疏肝健脾活血方高剂量组大鼠胃窦组织5-HT蛋白表达显著上调(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组及多潘立酮组大鼠胃窦组织SP蛋白表达非常显著下调(P<0.01),疏肝健脾活血方中剂量组及柴芍六君子汤组大鼠胃窦组织SP蛋白表达显著下调(P<0.05),疏肝健脾活血方高剂量组大鼠胃窦组织SP蛋白表达显著低于柴芍六君子汤组(P<0.05)。结果表明疏肝健脾活血方具有调节肝郁脾虚型FD大鼠iNOS、5-HT及SP的作用,活血中药能够增强疏肝健脾药抑制胃窦组织SP蛋白表达的作用。5.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD大鼠下丘脑iNOS、5-HT、SP基因表达的影响与正常组比较,模型组大鼠下丘脑iNOS、5-HT、SP基因表达均非常显著下调(P<0.01)。给药干预14d后,疏肝健脾活血方高剂量组和多潘立酮组大鼠下丘脑iNOS基因表达非常显著上调(P<0.01),疏肝健脾活血方中剂量组、低剂量组及柴芍六君子汤组大鼠下丘脑iNOS基因表达显著上调(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组、中剂量组及柴芍六君子汤组大鼠下丘脑5-HT基因表达非常显著上调(P<0.01),疏肝健脾活血方低剂量组及多潘立酮组大鼠下丘脑5-HT基因表达显著上调(P<0.05);疏肝健脾活血方各剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子汤组大鼠下丘脑SP基因表达均非常显著上调(P<0.01)。6.疏肝健脾活血方对肝郁脾虚型FD大鼠下丘脑OB-R1和CCKAR基因及蛋白表达的影响与正常组比较,模型组大鼠下丘脑OB-R1和CCKAR基因及蛋白表达均非常显著上调(P<0.01)。给药干预14d后,疏肝健脾活血方高剂量组、中剂量组、多潘立酮组及柴芍六君子组大鼠下丘脑OB-R1基因表达非常显著下调(P<0.01),疏肝健脾活血方低剂量组大鼠下丘脑OB-R1基因表达显著下调(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组和多潘立酮组大鼠下丘脑CCKAR基因表达非常显著下调(P<0.01),疏肝健脾活血方中剂量组、低剂量组及柴芍六君子组大鼠下丘脑CCKAR基因表达显著下调(P<0.05);疏肝健脾活血方高剂量组及多潘立酮组大鼠下丘脑0B-R1蛋白表达非常显著下调(P<0.01),疏肝健脾活血方中剂量组、低剂量组及柴芍六君子汤组大鼠下丘脑OB-R1蛋白表达显著下调(P<0.05);疏肝健脾活血方各剂量组及柴芍六君子组大鼠下丘脑CCKAR蛋白表达显著下调(P<0.05),多潘立酮组大鼠下丘脑CCKAR蛋白表达非常显著下调(P<0.01)。结论:1.疏肝健脾活血方能够有效改善肝郁脾虚型FD患者临床症状、生活质量及精神心理状态,疗效优于多潘立酮,且安全性较好。2.疏肝健脾活血方能够促进肝郁脾虚型FD大鼠胃肠运动、调节脑肠肽,这可能是其治疗肝郁脾虚型FD的作用机制之一。3.活血中药能够增强疏肝健脾中药抑制肝郁脾虚型FD大鼠分泌CCK、SP的作用,降低内脏敏感性。