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目的研究DN大鼠血清AT1受体自身抗体(AT1 receptor autoantibody, AT1-AA)与肾脏组织微小RNA-155(miRNA-155)之间的关系；探讨AT1-AA对内质网应激(Endoplasmic reticulum stress, ERS)相关因子葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78, GRP78), CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer binding protein-homologous protein, CHOP),磷酸化的c-Jun氨基端激酶(Phosphorylated c-Jun N-terminal kinase, p-JNK)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)表达的影响；并观察厄贝沙坦(Irbesartan, Irb)对AT1-AA阳性DN大鼠肾脏ERS相关凋亡分子表达的影响,从而明确AT1-AA在促进肾脏足细胞凋亡过程中的可能机制。方法动物实验：36只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(NC组,n=6)和模型组(Model组,n=30),Model组大鼠给予高糖高脂喂养联合小剂量(35mg/kg)链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)腹腔注射建立DN大鼠模型。模型成功后持续观察8周,酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)技术检测两组大鼠血清AT1-AA水平。根据ELISA结果,将AT1-AA阳性和阴性DN大鼠分到DN组(n=12)和Irb干预组(n=12)中,并进一步亚分为AT1-AA阳性DN(AT1-AA positive DN, APD, n=8)、AT1-AA阴性DN(AT1-AA negative DN, AND, n=4)、Irb+APD(n=7)和Irb+AND(n=5)四组。Irb干预组给予Irb(50mg·kg-1·d-1)灌胃治疗,4周后结束实验。检测各组大鼠血糖(Blood glucose, BG)、肾功能指标及肾脏肥大指数(KW/BW);苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin, HE)染色和透射电镜观察各组大鼠肾小管和肾小球病理变化；实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR, RT-PCR)法测定肾组织miRNA-155的表达；原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling, TUNEL)法检测肾小管上皮细胞和肾小球足细胞凋亡；Western blot和RT-PCR技术测定肾脏ERS标志蛋白GRP78及凋亡蛋白CHOP、 p-JNK和Caspase-12表达及相应mRNA水平。统计学分析比较各组间检测指标的差异性和有关数据的相关性。细胞实验：将分化成熟的大鼠足细胞分为正常糖组(NG),高糖组(HG)和AT1-AA+高糖组(AHG)。收集培养24h,48h和72h的三组足细胞,’TUNEL法检测各组足细胞凋亡率,免疫细胞化学法对GRP78, CHOP, p-JNK和Caspase-12蛋白进行定性分析,然后运用Western blot和RT-PCR技术测定前述蛋白表达及相应的mRNA水平。结果动物实验：1) Model组大鼠AT,-AA水平和阳性率明显高于NC组(P<0.01和P<0.05)。2)DN大鼠肾组织中miRNA-155的表达显著高于NC大鼠(P<0.01),进一步比较显示,AND亚组大鼠miRNA-155表达亦明显高于APD亚组大鼠(P<0.05)。3)DN组大鼠肾脏细胞凋亡较NC组显著增加,其GRP78、CHOP、p-JNK 和 Caspase-12蛋白及mRNA水平也显著增加,Irb干预后明显降低(均P<0.01)。4)APD组大鼠肾脏凋亡细胞数量及前述蛋白和mRNA水平均高于AND组大鼠(P<0.05或P<0.01)。5) Irb+APD组大鼠肾脏细胞凋亡率减少,ERS相关蛋白表达下调及mRNA水平降低均较Irb+AND组更明显(P<0.05或P<0.01)。细胞实验：高糖培养的大鼠足细胞中,AT1-AA介导组的凋亡率明显高于无AT1-AA介导组(均P<0.01)；AT1-AA可呈时间依赖性上调ERS伴侣蛋白GRP78以及ERS相关凋亡蛋白CHOP, p-JNK和Caspase-12的表达,且前述mRNA的增加趋势与相应蛋白水平基本一致。结论1) 糖尿病肾病(DN)大鼠血清高滴度的AT1-AA可能与肾脏结构和功能损害有关,并与肾脏细胞(包括肾小管上皮细胞和肾小球足细胞)凋亡关系密切；2) DN大鼠血清AT1-AA的产生可能与肾脏组织中miRNA-155的负向调控机制有关；3) AT,-AA可能诱导肾脏ERS反应,并进一步活化ERS相关的CHOP/JNK/ Caspase-12凋亡信号通路,促进因过度ERS反应而损伤的肾脏细胞凋亡,从而加重DN大鼠肾脏损害；4) AT1R拮抗剂(厄贝沙坦)能拮抗AT1-AA介导的肾脏ERS反应,阻断ERS相关的凋亡信号通路,减轻DN状态下肾脏细胞损伤,起到改善肾脏功能、保护肾脏的作用；5) AT1-AA可能通过诱导ERS相关凋亡蛋白CHOP, p-JNK和Caspase-12的表达上调,促进体外培养大鼠足细胞凋亡。