乙酰基转移酶GCN5对于拟南芥花干细胞调控机制的研究

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乙酰基转移酶能够乙酰化组蛋白,参与到许多基因调控通路中发挥其作用。GCN5基因编码拟南芥中重要的乙酰基转移酶,我们通过统计gcn5-7突变体中花器官的数目以及观察到雌蕊缺失的表型推测GCN5可能参与到花干细胞调节WUS/AG通路中调节花器官的发育。在WUS/AG调控花发育途径中,WUS诱导AG的表达,AG参与PcG-介导的H3K27me3抑制标记的驱除过程,从而诱导KNU的表达,KNU反过来抑制WUS,起始花器官的分化。我们首先验证了 GCN5确实可以在花器官中广泛表达,而且GCN5蛋白是在细胞核内发挥功能的表观遗传修饰因子;由于GCN5基因编码乙酰基转移酶,因此我们检测了 WUS/AG通路中相关基因的乙酰化水平,也发现AG在gcn5-7的突变体中关键调控区域的乙酰化水平明显下降。同时在中晚期花中,AG表达量下降并且表达部位主要集中在花的基部,说明GCN5可能直接调控AG的表达;但是GCN5本身没有DNA的结合域,我们通过拟南芥转录因子酵母筛库的方法找到了可能招募GCN5蛋白复合体并可以结合AG启动子区域的转录因子PAN(AT1G68640)。另外,我们也通过杂交的手段观察双突变体的表型来研究GCN5与WUS/AG通路中关键基因的遗传关系。结果显示,knu-2 gcn5双突变体的表型趋向于gcn5单突的弱表型,并没有出现knu-2花分生组织不确定性导致的雌蕊内部产生异位心皮的表型,这说明knu-2花分生组织的不确定性可能需要GCN5的功能。
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