【摘 要】
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目的:研究益气健脾抗癌方增强脾气虚肠癌小鼠化疗疗效的作用及机制。方法:选取40只SPF级雄性BALB/c小鼠,随机选取6只作为健康组（自然生长,不做任何处理）,其余小鼠通过劳倦过度+饥饱失常+苦寒泻下法建立脾气虚模型,然后皮下接种CT-26小鼠结肠癌细胞,待瘤体长出后将荷瘤小鼠随机分成对照组（即荷瘤对照组,每天使用生理盐水灌胃及腹腔注射）,中药组（单纯使用益气健脾抗癌方灌胃治疗）,化疗组（采用FO
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目的:研究益气健脾抗癌方增强脾气虚肠癌小鼠化疗疗效的作用及机制。方法:选取40只SPF级雄性BALB/c小鼠,随机选取6只作为健康组（自然生长,不做任何处理）,其余小鼠通过劳倦过度+饥饱失常+苦寒泻下法建立脾气虚模型,然后皮下接种CT-26小鼠结肠癌细胞,待瘤体长出后将荷瘤小鼠随机分成对照组（即荷瘤对照组,每天使用生理盐水灌胃及腹腔注射）,中药组（单纯使用益气健脾抗癌方灌胃治疗）,化疗组（采用FOLFOX方案腹腔注射）,联合用药组（采用益气健脾抗癌方+FOLFOX方案）。各组药物干预14天后,观察各组小鼠一般情况,检测荷瘤小鼠瘤体质量、瘤体体积,计算抑瘤率;采用TUNEL染色法检测各组瘤体中的细胞凋亡;计算各组小鼠主要脏器的器官指数,HE染色观察主要器官的组织病理学改变;全自动血液分析仪检测小鼠血液中血细胞数量及血红蛋白（Hb）水平;流式细胞术检测瘤体及脾脏中CD4+T细胞、Th17细胞、Treg细胞的表达情况,ELISA法检测瘤体中IL-17、IL-10、IFN-γ、TGF-β的水平;免疫组化检测瘤体中Ki-67、PCNA、RORγt、FOXP3蛋白的表达。结果:脾气虚肠癌小鼠模型建立成功。用药完毕后,与对照组相比,中药组、化疗组、联合用药组对荷瘤小鼠的瘤体质量、瘤体体积均有不同程度的抑制作用（P＜0.05）,经过准确的计算,抑瘤率分别为:23.56%、48.98%、61.91%,可见联合用药组抑瘤效果最好。免疫组化显示,与对照组相比,中药组、化疗组、联合用药组肿瘤组织中Ki-67、PCNA蛋白相对表达量均降低,且差异具有显著统计学意义（P＜0.01）;相对而言,联合用药组较化疗组更低,两组差异具有统计学意义（P＜0.05）。TUNEL凋亡染色显示,与对照组相比,化疗组、联合用药组肿瘤细胞凋亡明显增多（P＜0.01）,且两组相比联合用药组的细胞凋亡最多（P＜0.05）。器官指数方面,与健康组相比,各处理组小鼠的脾脏指数均有不同程度升高（P＜0.01）;与化疗组比较,联合用药组的脾脏指数降低（P＜0.05）。血常规显示,与化疗组相比,联合用药组红细胞升高,且差异具有统计学意义（P＜0.05）;Hb、白细胞升高,但两组差异不明显,无统计学意义（P＞0.05）。HE染色显示,除化疗组可见心脏病理损伤,其余各组心脏、肝脏、肾脏、肺脏组织均未见明显器官损伤。流式细胞术显示,与对照组相比,中药组、联合用药组脾脏中CD4+T细胞比例明显增高（P＜0.01）,而Treg、Th17细胞的差异不具有统计学意义（P＞0.05）。在肿瘤组织中,与化疗组比较,联合用药组肿瘤组织中CD4+T、Th17细胞比例明显增高,Treg/Th17降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,Treg的比例也降低。ELISA显示,与化疗组比较,中药组、联合用药组肿瘤组织中IL-17、IFN-γ含量明显升高,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。与化疗组的效果进行比较,联合用药组中可以明显观察到IL-10、TGF-β含量出现了大幅降低的情况,差异具有统计学意义（P＜0.05）。免疫组化法显示,与对照组及化疗组比较,中药组及联合用药组肿瘤组织中RORγt蛋白的相对含量显著增高,FOXP3蛋白相对含量显著下降,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。结论:益气健脾抗癌方能增强脾气虚肠癌荷瘤小鼠的化疗疗效,抑制肿瘤细胞的增殖、促进肿瘤细胞的凋亡,其机制可能是通过提高肿瘤组织中Th17细胞的比例,降低Treg细胞的比例,从而改善肿瘤微环境有关。
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