整合素受体介导的bcl-2反义核酸对结肠癌细胞的作用

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目的: 通过结肠癌细胞表面的整合素受体,探讨以整合素配体-聚乙烯亚胺复合物(polyethyleneimine,PEI)为载体,携带bcl-2反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)作用于结肠癌caco-2细胞,观察RGD-PEI-bcl-2 ASODN对结肠癌细胞caco-2靶向投递和增殖抑制作用,并且与化疗药物联合作用,提高了结肠癌细胞对化疗药物的敏感性,为结肠癌的治疗提供的实验依据。 方法: 1.将阳离子复合物RGD-PEI与荧光标记的bcl-2 ASODN混合形成RGD-PEI-ASODN复合物,转染caco-2细胞。以肝细胞LO2为对照,用流式细胞仪检测细胞摄入ASODN的阳性百分率和细胞内的平均荧光强度,荧光显微镜观察细胞对ASODN的摄入情况。 2.用台盼蓝拒染法检测RGD-PEI-ASODN对caco-2细胞的增殖抑制作用,用流式细胞仪检测细胞的亚二倍体百分率,荧光显微镜观察Heochst33258染色的细胞凋亡形态。 3.化疗药物三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)或羟基喜树碱(hydroxy icamptothecine,HCPT)联合RGD-PEI-ASODN作用于结肠癌caco-2细胞,使用改良的MTT法检测细胞增殖抑制作用,计算增殖抑制率和IC50,并用金正均Q值法判断化疗药物与RGD-PEI-ASODN联合使用的效果。
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