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目的:体外评价蒽环类及紫杉类化疗药物与乳腺癌耐药相关基因MDR1和BCRP表达的关系。方法: 1,体外培养人乳腺癌MCF-7细胞并将其接种入无菌细胞培养板,给予不同浓度阿霉素,表阿霉素,紫杉醇和多西紫杉醇分别干预MCF-7细胞不同时间后,采用RT-PCR检测及PCR产物电泳分析方法检测MDR1,BCRP基因的表达水平。2,实时荧光定量PCR技术进一步检测不同浓度阿霉素和表阿霉素干预不同时间段后MDR1、BCRP基因的表达量,并评价蒽环类药物干预浓度和干预时间与以上基因表达间的量效关系。3,以华中科技大学附属协和医院乳腺甲状腺外科在2004年1月～2005年12月期间接受“乳腺癌改良根治术”并进行体外药物敏感实验的乳腺癌患者为研究对象,根据药敏结果分别筛选对蒽环类药物高度敏感和对蒽环类药物耐药的乳腺癌组织标本,检测其中MDR1、BCRP基因表达量的差异及其在临床中的意义。4,采用流式细胞技术检测在不同浓度阿霉素干预后MCF–7中干细胞的比例,并分别检测各主要亚细胞群中MDR1基因表达量的变化,探讨多药耐药形成中的可能机制。结果:蒽环类药物干预与乳腺癌细胞MCF-7的MDR1基因表达量间有密切关系,MDR1基因随蒽环类药物浓度的增加和作用时间的延长,其表达量也随之增加。而蒽环类药物与BCRP基因间及紫杉类药物与MDR1,BCRP间都无明显的量效关系。蒽环类药物干预后的乳腺癌细胞MCF-7的BCRP基因的表达无明显规律,紫杉类药物干预后的MCF-7的MDR1和BCRP基因的表达量也无明显差异。此外,对比两种蒽环类药物干预后的MCF-7细胞中MDR1及BCRP基因的表达量,发现两种药物间无显著差异。且在体外药敏中对蒽环类药物高度敏感的肿瘤组织中MDR1的表达量要明显低于对蒽环类药物耐药的肿瘤组织。此外,对照流式细胞分选结果和相应细胞亚群MDR1基因水平,发现随着阿霉素药物干预浓度的增加和作用时间的延长,MCF-7细胞中干细胞池出现富集现象,同时, CD44~+CD24~-和CD44~+CD24~+两亚细胞群中,MDR1基因的表达水平也随之增高。结论:该研究结果证实了蒽环类药物是MDR1基因编码产物p-gp蛋白的特异性底物之一。临床通过检测MDR1的表达量可以较准确的预测蒽环类药物的疗效,并为个体化的选择敏感性药物提供一定的实验依据。且两种蒽环类药物(阿霉素及表阿霉素)在体外诱导MDR1基因表达的能力方面无明显差异。同时,乳腺癌多药耐药的形成不仅仅是基于肿瘤干细胞选择性的存活,也可能部分源于乳腺癌细胞对化疗药物的适应性功能基因表达变化。