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目的:高血压作为一种全球流行性疾病,已有相关研究表明交感神经和肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的激活在高血压的发生和发展中起着极其重要的作用。应用药物可抑制交感神经和RAAS系统的过度激活以起到降压的作用,但需要长期服用,并存在药物副反应。近年来,国内外的研究表明,采用经皮导管去肾交感神经射频消融术(RFA)可有效的抑制交感神经和RAAS系统的过度激活使血压下降,达到治疗顽固性高血压的目的,进而使靶器官获益。由于这是一项治疗顽固性高血压的新技术,是在传统方法上的突破和创新,需要大量的基础以及临床研究来证明其安全有效性。已有研究显示该项技术可以使得自发性高血压大鼠(SHR)的血压下降将近40mm Hg。本研究旨在观察SHR去肾交感神经手术前后血压的变化以及对靶器官的影响,探讨去肾交感神经术对SHR血压的干预效果及相关靶器官的影响,进而为治疗原发性高血压提供新的治疗方法。方法:将12周龄的青年SHR(n=24)作为研究对象,联合应用外科手术切除及化学消融方法(10%的苯酚酒精溶液)建立去肾交感神经模型。将其随机分为去肾交感神经术组(RDN组)和假手术组(Sham组)。相同周龄的WKY大鼠(n=12)为基线对照组。术前及术后每周测量一次血压及体重至处死前一天。并分别于术后1w、8w、12w随机处死各组大鼠各4只,分别留取血浆、心脏、肾脏、主动脉。用ELISA法测定血浆中去甲肾上腺素(NE)及血管紧张素II(Ang II)的含量。计算左室质量指数(LVMI);心肌组织进行HE染色观察左心室心肌细胞形态;Western Blot法分别检测左心室α-MHC和COL I的蛋白表达。肾脏组织进行HE染色观察肾脏形态,进行PAS染色观察肾小球硬化程度;Western Blot法检测肾脏COL I的蛋白表达。主动脉进行HE染色观察主动脉形态,应用Image-Pro Plus 6.0测量血管内径(Luminal radius,LR)、血管中膜厚度(Media thickness,MT),计算血管中膜厚度/血管内径(MT/LR)。采用SPSS 13.0版软件进行统计分析,定量资料采用均数±标准差(?x±s)表示,两组均数间的比较采用t检验,多组均数间的比较采用单因素方差分析(one way ANOVA),多个时间点进行的重复测量采用重复测量方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1体重的比较RDN组与Sham组在手术前及术后每周的体重比较无统计学差异(P>0.05)。但RDN组与Sham组在手术前及术后每周的体重均低于WKY组(P<0.05)。2各组收缩压的测量术前RDN组与Sham组的SBP无统计学差异(175.0±2.8mm Hg vs.174.5±2.7mm Hg)(P>0.05),且均大于WKY组的SBP(132.2±4.2mm Hg)(P<0.05)。与Sham组相比,RDN组的SBP在术后1w、2w、3w、4w、5w均低于Sham组(145.3±1.6mm Hg vs.181.0±3.7mm Hg,154.8±2.9mm Hg vs.190.4±7.7mm Hg,160.3±4.5mm Hg vs.196.0±6.4mm Hg,166.2±4.3mm Hg vs.203.6±8.0mm Hg,184.6±3.2mm Hg vs.201.5±9.0mm Hg)(P<0.05),术后6w及以后各时间点两组SBP均无明显差异(P>0.05)。与WKY组相比,RDN组和Sham组各对应时间点的SBP均高于WKY组(P<0.05)。Sham组的SBP术后1w较术前稍升高(181.0±3.7mm Hg vs.174.5±2.7mm Hg)(P<0.05),术后2w(190.4±7.7mm Hg)与术后1w无明显变化(P>0.05),术后3w(196.0±6.4mm Hg)较术后2w稍升高(P<0.05),术后3w以后SBP一直维持在较高水平且无明显变化(P>0.05)。WKY组各个时间点的SBP均无明显变化(P>0.05)。3血浆NE含量的变化术后1w RDN组血浆中NE含量与WKY组相比无统计学差异(169.1±3.8pg/ml vs.170.4±3.2pg/ml)(P>0.05),且二者均显著低于Sham组(222.3±4.2pg/ml)(P<0.05)。术后8w RDN组血浆中NE含量与Sham组相比无统计学差异(231.4±3.8pg/ml vs.234.5±2.7pg/ml)(P>0.05),且均高于WKY组(171.3±5.6pg/ml)(P<0.05)。术后12w RDN组血浆中NE含量与Sham组相比无统计学差异(238.6±2.7pg/ml vs.241.1±5.9pg/ml)(P>0.05),且均高于WKY组(171.4±5.4pg/ml)(P<0.05)。术后1w RDN组血浆中Ang II含量与WKY组相比无统计学差异(90.0±1.4pg/ml vs.89.3±2.4pg/ml)(P>0.05),且二者均显著低于Sham组(171.9±2.8pg/ml)(P<0.05)。术后8w RDN组血浆中Ang II含量与Sham组相比无统计学差异(174.5±2.0pg/ml vs.173.9±1.5pg/ml)(P>0.05),且均高于WKY组(90.1±3.2pg/ml)(P<0.05)。术后12w RDN组血浆中Ang II含量与Sham组相比无统计学差异(173.5±1.9pg/ml vs.173.3±2.8pg/ml)(P>0.05),且均高于WKY组(90.1±2.9pg/ml)(P<0.05)。5 LVMI的变化RDN组与Sham组相比术后1w、8w、12w的LVMI均无统计学差(P>0.05),但上述两组LVMI在各自时间点均显著高于相应WKY组(P<0.05)。6心肌HE染色观察三组大鼠心肌细胞形态学变化WKY组术后1w、8w、12w的心肌细胞大小均正常,排列整齐,心肌细胞核呈椭圆形,居于细胞中央,心肌间质无明显增生表现。RDN组与Sham组术后1w、8w、12w的心肌细胞均出现不同程度的损伤,表现为心肌细胞肥大且排列较紊乱,心肌间质明显水肿,部分心肌细胞溶解,周围结构不清。7 Western Blot法检测大鼠心脏α-MHC以及COL I的蛋白表达含量与Sham组相比,RDN组术后1w、8w、12wα-MHC的蛋白表达含量无统计学差异(P>0.05),且均低于相同时间点WKY组的蛋白表达含量(P<0.05)。与Sham组相比,RDN组术后1w、8w、12w COL I的蛋白表达含量无统计学差异(P>0.05),且均高于相同时间点WKY组的蛋白表达含量(P<0.05)。8肾脏HE染色及PAS染色观察三组大鼠肾脏形态学变化及肾小球硬化WKY组术后1w、8w、12w的肾小球大小及形态均正常,肾小管排列规则。RDN组与Sham组术后1w、8w、12w的个别肾小球皱缩甚至硬化,部分肾小球可见代偿性肥大,部分肾小管萎缩。9 Western Blot法检测肾脏COL I的蛋白表达含量与Sham组相比,RDN组术后1w、8w、12w COL I的蛋白表达含量无统计学差异(P>0.05),且均高于相同时间点的WKY组的蛋白表达含4血浆中Ang II含量的变化量(P<0.05)。10主动脉HE染色观察三组大鼠主动脉形态学变化及相关指标的测量WKY组的主动脉血管内径(LR)、中膜厚度(MT)及MT/LR在术后1w、8w、12w无明显变化(P>0.05),且内径及中膜厚度均正常,血管壁细胞排列规则。Sham组的主动脉血管内径(LR)、中膜厚度(MT)及MT/LR在术后1w、8w、12w逐渐增大(P<0.05),且血管壁细胞排列不规则,细胞密度减低。RDN组的主动脉血管内径(LR)、中膜厚度(MT)及MT/LR在术后1w、8w、12w逐渐增大(P<0.05),且与相同时间点的Sham组无明显差别(P>0.05),均大于相同时间点的WKY组(P<0.05)。结论:1去肾交感神经术对大鼠的生长无影响,但长期高血压则阻碍大鼠的生长。2去肾交感神经术有降压的作用,尤其是术后1w血压明显下降,但其降压效果并不能稳定而持久。3去肾交感神经术降低血压的机制在于NE分泌的减少以及对RAAS系统的抑制。4由于去肾交感神经术仅能短暂降压,而不能持久、稳定的降压,因此高血压相关的靶器官的损伤也未能得到明显的改善。