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【目的】在中国,前列腺癌发病率迅速升高,现已成为男性泌尿生殖系统发病率第一的恶性肿瘤,严重威胁着男性生命健康。目前,前列腺穿刺活检仍是前列腺癌诊断的金标准。但与此同时,由于PSA（Prostate Specific Antigen,前列腺特异性抗原）的诊断特异性较低以及穿刺指征的过度放宽,导致了许多不必要的前列腺穿刺活检。前列腺穿刺活检是一项令人痛苦的侵入性操作,可能带来出血、感染等一系列并发症。因此,新的前列腺癌特异性标志物的开发迫在眉睫,以期能够在尽可能地发现临床显著前列腺癌患者的同时避免大量不必要的穿刺活检。本研究通过检测尿液外泌体中的PCA3（Prostate Cancer Antigen 3,前列腺癌抗原3）和PRAC（Prostate Cancer Susceptibility Candidate）mRNA,对比其在良性前列腺增生和前列腺癌患者中表达的差异,并探索尿液外泌体PCA3/PRAC指数在中国低PSA人群中对前列腺癌和高级别前列腺癌的诊断价值。以期通过尿液外泌体检测在穿刺活检前鉴别高级别与低级别前列腺癌,以减少部分不必要的穿刺。【材料与方法】收取由于血PSA升高和或直肠指诊异常（血PSA<20ng/ml）而需进行前列腺穿刺活检患者活检前的晨尿,共57例,根据前列腺穿刺活检结果将患者分为良性前列腺增生组（n=43）和前列腺癌组（n=14）,根据Gleason评分将前列腺癌组进一步分为高级别前列腺癌组（Gleason评分≥7分,n=8）和低级别前列腺癌组（Gleason评分=6分,n=6）。通过超高速离心法分离患者尿液中的外泌体,提取外泌体总RNA（Ribonucleic Acid,核糖核酸）,对收获的总RNA进行逆转录合成c DNA（complementary Deoxyribonucleic Acid,互补脱氧核糖核酸）,通过实时荧光定量PCR（Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应）检测尿液外泌体中的PRAC和PCA3基因的表达量,根据2-ΔΔCt法计算基因的相对表达量。使用Mann-Whitney U检验比较不同分组之间尿液外泌体中PCA3和PRAC mRNA（Messenger Ribonucleic Acid,信使核糖核酸）的相对表达量和PCA3/PRAC指数。使用ROC（Receiver Operating Characteristic,受试者工作特征）曲线分析评估尿液外泌体PCA3/PRAC指数分别对前列腺癌和高级别前列腺癌的诊断价值。【结果】1.实时荧光定量PCR实验结果显示,尿液外泌体PCA3 mRNA相对表达水平在前列腺癌组和良性前列腺增生组中分别为16.27±6.70和9.21±2.06,p=0.45,未达到统计学差异;在高级别前列腺癌组、低级别前列腺癌组和良性前列腺增生组分别为24.88±10.82,4.78±2.73和9.21±2.06,高级别前列腺癌组和良性前列腺增生组差异未达到统计学意义（p=0.08）。尿液外泌体PRAC mRNA相对表达水平在前列腺癌组和良性前列腺增生组中分别为2.52±0.69和11.32±2.67,p=0.014,差异有统计学意义;在高级别前列腺癌组、低级别前列腺癌组和良性前列腺增生组分别为3.74±1.05,1.10±0.39和11.32±2.67,在高级别前列腺癌组和良性前列腺增生组中差异未达到统计学意义（p=0.39）。尿液外泌体PCA3/PRAC指数在前列腺癌组和良性前列腺增生组中分别为119.84±29和80.19±23.02,p=0.01,差异有统计学意义;在高级别前列腺癌组、低级别前列腺癌组和良性前列腺增生组分别为133.55±44.69,101.57±35.47和80.19±23.02,在高级别前列腺组和良性前列腺增生之间差异有统计学意义,p=0.02。2.使用ROC曲线分析时,在诊断前列腺癌时尿液外泌体PCA3/PRAC指数的AUC（area under curve,曲线下面积）高于血PSA（0.723 vs 0.595）,在诊断高级别前列腺癌时尿液外泌体PCA3/PRAC指数的AUC同样高于血PSA（0.736 vs 0.529）。当使用5作为尿液外泌体PCA3/PRAC指数的截点时,对高级别前列腺癌的敏感性,特异性,阴性预测值和阳性预测值分别为:100%,57.1%,100%,27.59%。【结论】1.尿液外泌体中PCA3 mRNA的表达水平在前列腺癌组和高级别前列腺癌组患者中均高于良性前列腺增生组患者;尿液外泌体中PRAC mRNA的表达水平在良性前列腺增生组患者中高于前列腺癌组和高级别前列腺组患者;尿液外泌体PCA3/PRAC指数在前列腺癌组和高级别前列腺癌组患者中均显著高于良性前列腺增生组患者。2.使用尿液外泌体PCA3/PRAC指数可以有效地将高级别前列腺癌患者鉴别出来,减少在其余患者中不必要的前列腺穿刺活检。