两个水稻(Oryza sativa L.)热激转录因子的功能研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:emily9999
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生物体在高温和其它一些化学或者生理胁迫的环境中能被诱导产生热激蛋白。热激蛋白(heat shock protein,HSP)作为分子伴侣协助蛋白的重新折叠、稳定、胞内运输和降解,以阻止受损蛋白的累积,维护细胞内环境的稳定。真核生物中热激蛋白基因的表达受热激转录因子的调节。热激转录因子(heat stress transcription factors,HSFs)是热激反应的主要调控因子,对热激反应的调节起着重要的作用。正常生长条件下,热激转录因子呈无活性的单体状态,当生物体处在热激等胁迫环境中时,热激转录因子会立即转换成有活性的三聚体并进入细胞核中与热激元件结合,以募集其它转录因子而形成转录复合体,促进热激蛋白基因的表达。根据其基本的结构域,植物热激转录因子可分为三类:HSFA、HSFB、HSFC。与动物和微生物的HSFs相比,植物的HSFs具有功能的冗余性和多样性等特点。   近年来,关于高温等胁迫诱导热激转录因子以及热激转录因子提高植物耐热性的研究已取得了重要进展。然而,HSF与水稻生殖发育的关系以及水稻抗逆性的关系还有待进一步揭示。本研究对水稻HSFA2类的两个热激转录因子HSF26、HSF2292进行了功能研究,获得主要结果如下:   1:在水稻正常生长条件下HSF26、HSF2292基因有一定的低水平表达,热激处理能显著诱导两个基因表达。HSF2292的表达在氧化、水淹、干旱胁迫下也有一定的表达增加,但各种激素处理都不能诱导这两个基因的表达。   2:制备了HSF26、HSF2292的多克隆抗体,Western blot结果表明HSF26蛋白在正常情况下丰度是很低的,但在热诱导之后蛋白积累明显增加;HSF2292抗体可能由于制备的原因没有杂交的特异性。   3:亚细胞定位研究结果表明HSF26定位在细胞核,而HSF2292定位在细胞质与细胞核。   4:构建了HSF26,HSF2292的过量和反义表达载体,转化中花11。经检测T-DNA已整合到水稻基因组中。在正常生长条件下,部分To代Anti-26转基因植株花粉育性和小穗育性下降,T1代检测结果表明育性下降与转基因共分离。其它的各种转基因植株在正常生长条件下均没有明显的表型变化。
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