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目的:基于熊胆清热解毒的传统功效,研究体外培育熊胆粉(ABBP)抗病毒、抗菌、抗炎、镇痛的药理作用,并与天然熊胆粉(NBBP)对比分析,为体外培育熊胆粉替代天然熊胆粉提供依据。 方法:1.抗病毒实验:采用细胞病变(CPE)抑制法测定ABBP和NBBP对单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)、呼吸道合胞病毒(RSV)、H3N2型流感病毒、乙肝病毒抗原引起的CPE的半数抑制浓度(IC50)。2.抗菌实验:体外抗菌实验采用琼脂稀释法测定ABBP和NBBP对9种临床分离菌株的最低抑菌浓度(MIC),体内抗菌实验采用金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌感染动物模型测定动物死亡率及肺指数。3.抗炎实验:采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和角叉菜胶致大鼠足肿胀模型测定小鼠耳肿胀度和大鼠足肿胀度;分别采用Greiss法和HPLC-MS/MS技术测定小鼠耳肿胀模型耳组织样本一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)和前列腺素D2(PGD2)的含量。4.镇痛实验:采用醋酸和热板致小鼠疼痛模型测定小鼠扭体次数、潜伏期和热板痛阈值。 结果:1.抗病毒实验:ABBP对乙肝病毒表面抗原的IC50分别为130μg/mL; NBBP对单纯疱疹病毒和乙肝病毒表面抗原的IC50分别为96μg/mL、90μg/mL。2.抗菌实验:ABBP和NBBP体外对链球菌的MIC分别为1~8 mg/mL、1~2 mg/mL;体内质控金黄色葡萄球菌和临床金黄色葡萄球菌实验中ABBP和NBBP高剂量组小鼠死亡率与模型组相比显著性降低,体内质控肺炎链球菌和临床肺炎链球菌实验中,与模型组相比,NBBP中剂量、高剂量组小鼠肺指数显著性降低,ABBP组肺指数有一定的下降趋势。3.抗炎实验:与模型组相比,ABBP和NBBP组小鼠耳肿胀度、大鼠足肿胀度显著性降低;小鼠耳肿胀模型中ABBP组耳组织样本NO、PGE2和PGD2含量显著性降低,NBBP组PGE2和PGD2含量显著性降低,NO含量有下降趋势。4.镇痛实验:与模型组相比,ABBP和NBBP组小鼠扭体次数显著性降低,扭体潜伏期及热板痛阈值显著性升高。 结论:ABBP和NBBP具有体内抗金黄色葡萄球菌感染作用,NBBP对体内肺炎链球菌感染动物保护作用比ABBP明显。ABBP和NBBP在二甲苯和角叉菜胶诱导的急性炎症模型上具有抗炎作用,抗炎机制与抑制NO、PGE2和PGD2的生成有关。ABBP和NBBP在醋酸和热板所致疼痛模型上具有镇痛作用。ABBP在抗菌、抗炎及镇痛方面的作用基本与NBBP相近。