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目的:EMS1基因是胃癌相关基因。本研究以EMS1基因阳性表达的MGC803细胞为模型,采用siRNA技术,抑制MGC803细胞EMS1基因表达,观察EMS1基因表达抑制对MGC803细胞增殖的影响。方法:构建针对EMS1基因的pSilencer3.1-EMS1-siRNA表达载体,经脂质体转染,导入MGC803细胞,G418筛选,建立稳定的pSilencer3.1-EMS1-siRNA/MGC803细胞系。Western blotting检测Cortactin表达。通过绘制生长曲线、流式细胞仪分析,观察EMS1基因表达抑制后,MGC803细胞增殖速度、细胞周期分布变化。结果:重组质粒DNA经测序鉴定,结果均证实pSilencer3.1- EMS1-siRNA表达载体构建成功。将pSilencer3.1- EMS1-siRNA和pSilencer3.1质粒分别转染MGC803细胞,G418筛选阳性细胞克隆,经Western blotting检测结果表明,成功建立了EMS1基因表达下调的MGC803细胞系。直接计数法与MTT法绘制的细胞生长曲线结果均显示:pSilencer3.1-EMS1-siRNA/MGC803细胞与pSilencer3.1/MGC803细胞和MGC803细胞生长速度无明显差异(P>0.05);流式细胞仪检测上述三组细胞周期分布及凋亡情况,结果显示:转EMS1-siRNA的MGC803细胞与两对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05),提示EMS1基因在MGC803细胞中表达下调对细胞周期分布及凋亡无明显影响。结论:(1)构建了pSilencer3.1-EMS1-siRNA真核表达载体;(2)建立了EMS1基因表达下调的pSilencer3.1-EMS1-siRNA/ MGC803细胞系;(3)siRNA抑制EMS1基因表达不影响MGC803细胞增殖。