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研究背景和研究目的：肺癌是严重危害人类健康的一类疾病，具有较高的发病率与死亡率，已经成为癌症致死的首要原因。目前肺癌的治疗主要以化疗为主，但是现有的肺癌治疗的药物往往毒副作用较大且易引起耐药，因此，寻找高效、毒副作用较小又能有效地克服多药耐药的化疗药物对于肺癌的治疗具有极其重要的意义。近年来，随着对噻唑烷化合物的研究发现其具有广谱的生物活性，广泛应用于农业、化学、医药、生物学等诸多领域，能诱导多种肿瘤细胞的分化与凋亡，在癌症治疗方面显示出良好的应用前景。如MMPT和DBPT能通过影响细胞周期以及诱导肺腺癌细胞的凋亡途径来抑制肿瘤细胞的生长。鉴于噻唑烷化合物在肺腺癌中表现出的抗肿瘤活性以及在非小细胞肺癌中的潜在应用，我们选择YFZ-22（一种新型的噻唑烷化合物）作为研究药物，将其引入A549细胞中进行抗肿瘤活性的检测以及作用机制的初步研究，以期为肺癌的治疗提供理论依据。研究方法：1．体内抑瘤检测：建立裸鼠肺癌的移植瘤模型，给药后观察YFZ-22对体内肿瘤生长的抑制作用。2．分析YFZ-22对A549细胞体外生长的抑制作用：―XTT法检测细胞存活率；―克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力。3．YFZ-22对A549细胞的凋亡诱导作用：―倒置相差显微镜观察细胞的形态；―吉姆萨染色检测细胞凋亡的形态学变化；―Hoechst33258荧光染色，荧光显微镜下观察细胞核的片段化；―Nucleosome ELISA试剂盒检测细胞凋亡率。4．细胞周期检测：流式细胞术检测YFZ-22对A549细胞周期的影响。5．调控细胞周期运转及凋亡的基因p53、p21表达检测：ELISA法检测p53、p21蛋白表达。6．细胞内ROS、GSH水平检测：荧光分光光度计检测细胞内ROS、GSH水平。7．细胞凋亡途径检测：―Caspase酶活检测试剂盒分析Caspase的酶活变化；―ELISA法检测Caspase酶抑制剂对YFZ-22诱导的细胞凋亡的影响。研究结果：1．YFZ-22对体内A549细胞增殖的影响表明：YFZ-22能显著的抑制裸鼠皮下肿瘤的生长，且抑制A549细胞的增殖具有明显的时间依赖性，随着药物作用时间延长，其抑制率逐渐增大。2．YFZ-22对A549细胞体外生长的抑制作用：―XTT实验表明，YFZ-22可以显著抑制体外培养的A549细胞的生长，且随着药物浓度的增大，细胞存活率呈下降趋势，即呈现明显的剂量依赖性，并且对正常细胞毒性较小；―克隆形成实验表明，一定浓度的YFZ-22能够显著抑制A549细胞的克隆形成能力。3．YFZ-22诱导A549细胞凋亡的检测：―3.0μM的YFZ-22处理A549细胞48小时，倒置相差显微镜，吉姆萨染色以及Hoechst33258荧光染色可以观察到细胞的形态学变化，细胞数量明显减少，体积变小，变圆，细胞膜出芽发泡，细胞内空泡化现象严重，大多数细胞的细胞核固缩呈致密浓染，染色质凝集且边缘化，出现凋亡小体，处于凋亡的不同阶段，呈现出凋亡的形态学特征；―Nucleosome ELISA试剂盒检测核小体水平显示，用3.0μM和6.0μM的YFZ-22分别处理A549细胞6h、12h、24h、48h，核小体水平显著增加，表明YFZ-22能诱导A549细胞的凋亡，且具有明显的时间和剂量依赖性。4．流式细胞术对细胞周期的检测表明：用3.0μM的YFZ-22分别处理A549细胞6h、12h、24h后，引起A549细胞G2/M期阻滞。5．P53、p21蛋白表达的检测表明：YFZ-22上调了A549细胞内p53、p21蛋白水平，且在一定时期内具有时间依赖性。6．细胞内ROS、GSH水平检测表明：与对照组相比，YFZ-22处理的A549细胞内ROS水平有了显著提高且具有剂量依赖性，GSH水平显著降低，同样具有剂量依赖性。7．YFZ-22诱导A549细胞的凋亡机制研究：Caspase酶活检测以及Caspase抑制剂对凋亡诱导的影响表明，YFZ-22能诱导A549细胞凋亡，其凋亡过程可能与线粒体和内质网有关。结论：1．YFZ-22能抑制体内外A549细胞的增殖；2．YFZ-22诱导体外培养的A549细胞的凋亡；3．YFZ-22影响A549细胞的细胞周期，引起G2/M期阻滞；4．YFZ-22可能通过p53、p21的上调影响细胞周期并传递凋亡信号；5．YFZ-22能影响细胞内的氧化平衡，细胞凋亡可能与ROS和GSH的变化有关；6．YFZ-22可能通过线粒体途径和内质网途径诱导A549细胞凋亡。