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病毒性脑炎是中枢神经系统感染中最为常见的疾病之一，其进展迅速，致死致残率高，且由于缺乏明确的诊断方法，给治疗上带来不少难题。不少患者虽然进行抗病毒治疗，却因不能确诊病毒性脑炎或具体由哪一种病毒引起，因此不能有效、及时、准确的进行针对性治疗。为降低该类疾病的死亡率并提高生存率，这就要求临床上对导致疾病的病原体进行快速、准确的检测鉴定。目前的检测方法（如病原体培养、ELISA检测、生化检测等）费时费力或价格昂贵，且每次测试只能检测一种病原体，不能达到同时检测几种病原体的要求。目的：本研究的目的是通过Luminex200悬浮阵列系统，建立一种新的多重PCR快速准确的诊断平台，可高灵敏度、高特异性的同时检测几种病原体。这个平台相较于传统的分离鉴定病原学方法，将会为我们提供更经济的检测，更及时以及更全面的病原学信息。方法：本研究以病毒性脑膜炎和脑炎最为常见的5种病原体（EV71病毒,CA16病毒，ECHO病毒，乙脑病毒以及EB病毒）为研究对象。通过查找GenBank获得5种病原体的特异性基因，用oligo6对其保守序列进行特异性引物设计及探针设计，后BLAST比对筛选，确保所选用的引物及探针特异准确。选用可在液相中悬浮的独特颜色编码微球，共价耦合生物体特定的捕获探针，通过探针捕获检测特定病原体PCR扩增产物（引物已用生物素标记），将SAPE（链霉亲和素-R-藻红蛋白）与生物素结合后，即可用Luminex200机器检测，最后用临床标本评价其可行性。结果：通过单重PCR体系验证5种病原体引物的正确性后，进行多重PCR体系的优化，最终确定反应条件为58℃，40循环。同时，优化上机检测的最佳杂交条件为55℃，15min。目前，可同时对EV71病毒、ECHO病毒、柯萨奇A16病毒、乙脑病毒、EB病毒进行5重检测。检测结果与PCR验证实验一致，特异性为100％。我们同时进行了44例临床标本的检测，其中EB病毒感染7例，乙型脑炎2例，肠道病毒感染35例，检测结果与诊断基本相符，符合率达到97%。结论：基于Luminex200悬浮阵列系统的多重PCR快速灵活诊断平台，可高灵敏度高特异性的同时检测几种病原体。这个平台将会为我们提供更经济的检测，更及时以及更全面的病原学信息，帮助临床有针对性的应用抗病毒药物。