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猫疱疹病毒1型（Feline herpesvirus type 1,FHV-1）属于疱疹病毒科,α-疱疹病毒亚科成员,是典型的有囊膜的线状双股DNA病毒,可引起猫及猫科动物传染性鼻气管炎。目前,该病呈全世界流行,只感染猫科动物,其中26月龄幼猫最易感,发病率为100%,病死率可达到20%50%。感染FHV-1后,患病猫出现体温升高,可达到39.542℃,造成严重的上呼吸道及眼部症状,出现咳嗽、打喷嚏、呼吸啰音、眼鼻浆液性或脓液性分泌物增多等症状。由于本病与杯状病毒、衣原体、支原体、呼肠病毒引起的上呼吸道症状相似,所以很难通过临床症状区分鉴别,且本病常与杯状病毒、细小病毒混合感染,给本病的诊断带来了困难。目前,我国对FHV-1的相关研究较少,主要的预防手段还是依靠进口疫苗,国内尚无获得临床批件的自主研发疫苗,因此,建立FHV-1动物感染模型可为FHV-1的疫苗及治疗性药物的研发奠定基础。本实验室前期分离了一株FHV-1毒株,命名为FHV-1 CH-B株,进行扩大培养后测得效价为10-7.38TCID50/ml。本研究首先使用FHV-1 CH-B株进行了动物感染试验,通过滴鼻接种方式以0.5ml/鼻孔的剂量(10-7.38TCID50/ml)接种6-10周龄的健康未免疫中华田园猫,连续观察11d。通过观察临床症状、组织病理变化,监测体温变化,检测排毒情况,组织中病毒分布情况,确定该毒株的致病性。实验结果显示,接种后所有猫均发病,存活率40%,在接种后第2d开始排毒,出现体温升高、眼鼻分泌物增多,打喷嚏、呼吸啰音、眼鼻周围皮肤溃疡等症状,在肝脏、脾脏、肾脏、心脏等组织器官中未检测到FHV-1。由此说明FHV-1 CH-B株具有强致病性,感染猫后只造成上呼吸道感染,不会造成全身感染。使用FHV-1 CH-B株以滴鼻、口服、皮下注射三种接种方式分别接种6-10周龄的健康未免疫中华田园猫,滴鼻接种剂量0.5ml/鼻孔,口服和皮下在注射1ml,病毒效价为10-7.38TCID50/ml。接种后连续观察15d,通过观察临床症状、组织病理变化,监测体温变化,检测排毒情况确定最佳接种途径。实验结果显示滴鼻接种后的猫第2d体温升高,第4d体温达到40℃,接种第3d开始出现打喷嚏、眼鼻浆液性分泌物等症状,第4d症状加重,出现眼鼻脓液性分泌物、呼吸困难,精神沉郁等症状;口服接种后的猫初期体温波动不明显,在第9d体温升高至39.1℃,接种后第5d出现打喷嚏、眼鼻浆液性分泌物,第7d症状加重,出现眼鼻脓液性分泌物,呼吸困难等症状;皮下注射接种后的猫未出现体温升高和明显的症状。由此说明,滴鼻和口服的接种方式均可引起发病,皮下注射的接种方式不能引起发病。滴鼻接种方式引起发病最快,症状最显著且全部死亡。因此,确定滴鼻接种为最佳接种途径。其次,选取四种不同感染剂量以滴鼻接种方式接种A、B、C、D组进行动物感染试验,接种效价分别为:10-7.38 TCID50/mL、10-6.38 TCID50/mL、10-5.38TCID50/mL、10-4.38 TCID50/mL,接种剂量均为0.5ml/鼻孔。接种后连续观察15d,通过观察临床症状、组织病理变化,监测体温变化,检测排毒情况确定最低感染剂量。实验结果显示,接种FHV-1后A组第6d出现体温升高,于第7d全部死亡,无法观察体温变化;B组第3d开始体温升高,在第5d体温达到39.3℃,C组猫接种后第2d开始体温升高,第7d体温达到39.2℃;D组体温小幅度波动。A组接种后第2d出现眼鼻浆液性分泌物,打喷嚏等症状,第3d症状加重,第6d三只死亡,第7d全部死亡;B组接种后第4d出现眼鼻浆液性分泌物、打喷嚏、打呼噜等症状,第6d眼鼻浆液性分泌物转为脓液性分泌物、呼吸困难等症状;C组接种后第5d开始出现眼鼻浆液性分泌物、打喷嚏等症状,第7d症状加重,眼鼻浆液性分泌物转为脓液性分泌物、呼吸困难等症状;D组没有出现上呼吸道症状。实验结果说明,只有剂量为10-4.38TCID50/mL的攻毒剂量不能引起发病,其他三种剂量均能引起猫发病并死亡,所以确定最低接种剂量为10-5.38TCID50/mL。最后,根据之前试验中确定的最佳接种途径和最低感染剂量,采用滴鼻方式接种,接种剂量为10-5.38TCID50/mL,进行三次重复感染试验并连续观察20d。通过观察临床症状、组织病理变化,监测体温变化,检测排毒情况建立了动物感染模型。试验结果显示,接种后第3d开始体温升高,在第8d达到峰值,体温可达39.2℃,第9d体温开始有所回转。接种后第4d出现眼鼻浆液性分泌物、打喷嚏、打呼噜等症状,第8d症状明显加重,出现眼鼻脓液性分泌物,结膜炎、呼吸困难、眼鼻周围皮肤溃疡等症状,第10d俩只猫死亡。由此说明,采用滴鼻方式接种,接种剂量为10-5.38TCID50/mL,能够引起所有猫发病且死亡。本实验建立的FHV-1宠物猫感染模型,为疫苗制备及治疗药物的研发奠定基础。