硬质奶酪对维甲酸诱导大鼠骨质疏松防护作用的实验研究

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目的:研究硬质奶酪对维甲酸诱导大鼠骨质疏松的防护作用,以及硬质奶酪对成骨细胞增殖和矿化的影响。方法:1.采用原子吸收分光光度法测定硬质奶酪中钙的含量。2.维甲酸诱导大鼠骨质疏松模型及剂量分组,取雌性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、受试物高剂量组(10g/kg)、中剂量组(5g/kg)、低剂量组(2.5g/kg)和葡萄糖酸钙组(0.05g/kg),每组各8只。每日上午,除正常对照组给予蒸馏水1ml/100g外,其余各组用维甲酸按80mg/(kg.d),灌胃量1ml/100g,连续灌胃21d;下午正常对照组和模型组灌胃给予2ml/100g蒸馏水,各受试物组和葡萄糖酸钙组按设定剂量以2ml/100g灌胃28d,自由摄食饮水,观察期为30d。3.指标检测:骨密度测量、血清生化指标测定、骨矿含量测定、骨病理组织学检查和骨形态计量学的变化。4.体外培养新出生大鼠颅骨的成骨细胞,采用MTT法测定硬质奶酪对成骨细胞的增殖作用,采用Vonkossa染色观察硬质奶酪对成骨细胞矿化的影响。结果:1.硬质奶酪中钙的平均含量为784mg/100g。2.模型组的左侧股骨BMD明显低于正常对照组(P<0.001),左侧胫骨BMD明显低于正常对照组(P=0.008),相对灰重明显低于正常对照组(P=0.002),骨钙含量明显低于正常对照组(P=0.001),骨磷含量明显低于正常对照组(P=0.009),骨小梁面积百分数明显低于正常对照组(P<0.001),平均骨小梁宽度明显低于正常对照组(P<0.001);血清钙浓度高于正常对照组(P=0.020),ALP含量高于正常对照组(P=0.018),TRACP含量高于正常对照组(P<0.001),破骨细胞计数高于正常对照组(P<0.001);骨小梁的形态结构出见明显的病理变化,提示骨质疏松模型复制成功。3.高剂量组左侧股骨BMD高于模型组(P=0.001),胫骨BMD高于模型组(P=0.030),相对骨灰重高于模型组(P=0.011),骨钙含量高于模型组(P=0.021),骨小梁面积百分数高于模型组(P<0.001),平均骨小梁宽度高于模型组(P<0.001);骨小梁形态结构基本正常。4.硬质奶酪组成骨细胞培养72h后OD值高于空白对照组(P=0.010);Vonkossa染色显示钙盐沉积。结论:1.硬质奶酪是一种钙含量很高的天然食品。2.高剂量硬质奶酪能够提高大鼠BMD、骨量和骨钙含量,保持骨的代谢平衡和骨小梁的正常形态结构,起到对维甲酸诱导大鼠骨质疏松的防护作用,低、中剂量硬质奶酪对维甲酸诱导的大鼠骨质疏松没有防护效果。3.硬质奶酪可使体外培养的大鼠成骨细胞增殖、活性增强,促进骨矿化。
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