目的:本研究拟在小鼠饮食诱导肥胖的胰岛素抵抗模型上观察FGF1的降血糖作用;同时采用体外转录合成RNA技术,设计并合成稳定的FGF1 mRNA。以期为后续FGF1 mRNA回输体内表达自体蛋白,进一步对糖尿病的治疗作用研究提供一定的实验基础和理论依据。为FGF1降血糖作用机制的研究,为糖尿病和其他疾病治疗提供新的思路。方法:1.高脂饮食诱导构建肥胖小鼠（diet-induced obesity,DIO）胰岛素抵抗模型,皮下注射重组人FGF1（5μg/10 g）,模型组和正常组用PBS（0.1 m L/10 g）做空白对照（每组8只）,连续给药3 d,每天禁食4 h,分离血清,检测血糖变化。监测各组小鼠体重,饮水,摄食,垫料湿度等代谢指标。并进行统计学（SPSS18.0）分析。2.在质粒载体p T7TS上加poly A、globin 3’、5’UTR等基因构件并测序验证,得到修饰后的载体p T7TS。Gene Bank查找人源FGF1野生型基因序列,设计并合成经GC含量优化、二级结构分析的稳定FGF1序列,电泳验证并测序,得到优化的FGF1序列;后构建p T7TS-FGF1重组载体。3.重组质粒p T7TS-FGF1单酶切线性化,作为体外转录模板,通过T7 RNA聚合酶体外合成mRNA,纯化回收,后使用Vaccinia Capping System加5’cap结构,两步法合成加帽mRNA。Nanodrop测定OD值和产物浓度,电泳验证产物大小。通过改变模板含量、反应时间等,调整酶促反应条件,获得相对稳定高产的RNA体外转录方法。4.加帽前后mRNA室温暴露一定时间,通过电泳观察比较RNA的变化,验证mRNA稳定性修饰的作用。结果:1.重组人FGF1皮下注射于DIO模型小鼠,血清血糖检测发现,和模型对照组相比,实验组血糖明显下降,有显著差别（P<0.01）。2.测序结果显示成功修饰了p T7TS载体,并合成优化后的FGF1序列,后将目的序列与载体连接,得p T7TS-FGF1,BglⅡ、Eco R V双酶切并经测序验证。3.p T7TS-FGF1单酶切线性化后,通过T7 RNA聚合酶和Vaccinia Capping System采用两步法体外转录合成加帽FGF1 mRNA,Nanodrop测得浓度,且OD_260/280在1.9-2.2之间;行琼脂糖凝胶电泳,条带单一且大小相符。通过条件改变,获得相对高效的FGF1mRNA体外转录条件。稳定性分析显示,引入5’cap结构能降低所合成FGF1mRNA的降解。结论:本研究探讨并观察到了重组人FGF1在DIO小鼠模型上的降血糖作用。首次成功体外转录合成特异性FGF1 mRNA;设计了相对高效的两步法体外转录合成FGF1mRNA方案。本研究为后续FGF1 mRNA回输体内表达自体蛋白,进一步治疗糖尿病的研究提供了一定的实验基础和理论依据;为糖尿病和其他疾病治疗提供新的思路。