固定化蒽醌-2-磺酸对希瓦氏菌分泌黄素的影响

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醌类化合物作为氧化还原介体能够加速偶氮染料、硝基芳烃和氯代化合物等多种难降解有机污染物的厌氧生物转化。在污染物转化过程中,发现蒽醌-2磺酸(AQS)修饰的聚氨酯泡沫(AQS-PUF)能够诱导希瓦氏菌分泌黄素类物质。为揭示黄素在这一过程中的角色,本文分析了黄素对活性污泥脱色偶氮染料活性艳红X-3B的影响,以及富马酸钠和活性艳红X-3B作为电子受体时固定化醌对希瓦氏菌分泌黄素的影响。在此基础上,通过比较Shewanella sp.RQs-106和黄素腺嘌呤二核苷酸转运蛋白基因敲除菌株Shewanella sp.ZY分泌黄素的特性,揭示了黄素在偶氮染料脱色过程中的角色。首先,研究了黄素对活性污泥脱色活性艳红X-3B的影响。研究结果证明,在外加AQS-PUF,及AQS-PUF和Shewanella sp.RQs-106共同强化活性艳红X-3B脱色的上流式厌氧生物反应器出水中,检测到了黄素类物质。进一步研究发现,外加微量核黄素(20 nM和40 nM)能够使这两个反应器中活性污泥对活性艳红X-3B的脱色率分别提高了17%、10%和21%、11%。可见,黄素在脱色过程中起到了一定的作用。斯皮尔曼相关性分析表明,纲水平中Gammaproteobacteria、unclassifiespBacteroidetes、Synergistia和Spirochaetae与黄素分泌密切相关;属水平中Shewanella与黄素分泌最相关。其次,研究了富马酸钠作为电子受体时,希瓦氏菌分泌黄素的特性。研究结果表明,溶解态AQS对菌株RQs-106和菌株MR-1分泌黄素没有促进作用。AQS-PUF则能够促进这两株菌分泌黄素,并且随着固定化AQS浓度的增高而增高。当固定化AQS浓度为0.15 mM,菌株RQs-106和菌株MR-1分泌的黄素量最大,分别为0.223和0.301μmol/g。但当固定化AQS浓度为0.20 mM时,这两株菌的黄素分泌量降低。最后,研究了活性艳红X-3B作为电子受体时,希瓦氏菌分泌黄素的特性。研究结果表明,当活性艳红X-3B为0.65 mM时,其脱色速率和黄素分泌量随着固定化AQS浓度的增高而增高。当固定化AQS浓度为0.15 mM时,活性艳红X-3B脱色速率和黄素分泌量达到最大,分别为0.2911 h-1和0.143μmol/g。而不同活性艳红X-3B浓度对菌株RQs-106分泌黄素的促进作用不大。通过比较菌株RQs-106和黄素腺嘌呤二核苷酸转运蛋白基因敲除菌株ZY,发现黄素转运蛋白基因的敲除,使菌株ZY的黄素分泌量降低,部分低于检测限。当固定化AQS浓度为0.05 mM,活性艳红X-3B脱色速率比不加醌体系提高了3倍以上,其中黄素对脱色的贡献占22%以上。随着固定化醌浓度的增加,黄素对脱色的贡献反而降低,这表明黄素的分泌主要是还原固定化醌,还原态醌将电子再传递给活性艳红X-3B。在固定化醌介导的活性艳红X-3B脱色过程中,黄素起到了介体的作用。
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