RABEX-5信号通路对乳腺癌增殖、转移的影响及机理探讨

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目的:通过下调RABEX-5在乳腺癌细胞株MCF-7中的表达,在体外观察RABEX-5表达下调后对乳腺癌细胞株MCF-7增殖、转移的影响以及MCF-7对蒽环类药物和紫杉类药物的敏感性变化。并通过体内试验进一步验证RABEX-5对乳腺癌增殖、转移的影响,初步探讨其作用机理。方法:通过转染RABEX-5慢病毒载体已成功获得了RABEX-5下调表达的稳定细胞株(MCF-7/KD)及其阴性对照细胞株(MCF-7/NC)。应用克隆形成实验和细胞划痕实验,分别检测RABEX-5下调后对MCF-7细胞株增殖和转移的影响;应用cck-8方法检测RABEX-5沉默后,与其阴性对照相比对化疗药物敏感性的变化情况。在体内试验,通过裸鼠成瘤实验,进一步验证RABEX-5下调后对乳腺癌增殖、转移的作用及相关信号分子的表达。结果:RABEX-5在乳腺癌细胞株MCF-7中的表达下调后,MCF-7细胞的克隆形成能力及细胞迁移能力明显降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,RABEX-5下调表达后,MCF-7细胞对蒽环类药物表柔比星的化疗敏感性降低,半数致死浓度(IC50)分别为3.5900±0.22869μg/ml、1.1933±0.18771μg/ml,差异具有统计学意义(P<0.05);而对紫杉类药物多西他赛的敏感性不变,半数致死浓度(IC50)分别为11.1627±0.21026μg/ml、10.5367±0.43097μg/ml,差异无统计学意义(P>0.05)。沉默RABEX-5表达后,基质金属蛋白酶MMP-9mRNA的表达也下调。体内试验证明,MCF-7/KD组移植瘤的生长速度明显慢于MCF-7/NC组的生长速度;无论是移植瘤的终体积还是终重量,实验组明显小于对照组(P<0.05);Western blot及免疫组化结果显示,实验组中MMP-9的表达水平明显低于对照组(P<0.05).结论:RABEX-5表达下调后,乳腺癌的增殖、转移能力降低;并且使人乳腺癌细胞MCF-7对蒽环类药物表柔比星产生耐药,而对紫杉类药物多西他赛敏感;为进一步研究RABEX-5在乳腺癌个体化治疗中的作用提供理论基础。
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