脂肽是有代表性的生物表面活性剂，当它和化学表面活性剂复配使用时，能扩大低界面张力的区域，减少碱和化学表面活性剂的用量。脂肽由于表界面活性高，所以用量少，而石油磺酸盐又产生干扰，导致其在混合体系中分离检测困难。本文通过测定脂肽在溶剂中的分配系数，设计了从混合体系中分离脂肽的流程，采用膜过滤-分光光度法分离测定了混合体系中脂肽的含量。　　1)用HPLC测得脂肽在溶剂中的分配系数，结果表明在酸性环境中，脂肽在乙醚/水和二氯甲烷/水中的分配系数较大，分别为61和34，在碱性环境中，脂肽在正己烷/水和正戊烷/水中的分配系数较小，分别为0.010和0.023。在此基础上，通过选取分配系数大的溶剂酸化分离，分配系数小的溶剂碱化转相，最后再酸化萃取的流程将脂肽从混合体系中分离出来，该方法标准偏差S=0.47，相对标准偏差rD=6.6％，回收率92.1％。　　2)对水解过程进行了优化，将原来HCl溶液中的水解转移到气固界面进行，确定了快速水解条件为0.5 mL的浓HCl下150℃水解4h，缩短了时间。　　3)利用脂肽在碱性环境中和Cu2+生成配合物的性质，选用聚偏氟乙烯(PVDF)疏水膜将混合体系中的石油磺酸盐的干扰成分除去，然后采用分光光度法检测和脂肽络合的Cu2+浓度，从而得到脂肽的浓度，检出限达1.77 mg/L，回收率为97.8％-112.8％，S和rD分别为0.028和7.4％。　　脂肽分离测定的方法为从混合表面活性剂中分离脂肽提供了新的手段。