MSI2在胰腺癌上皮细胞间质转化中的作用

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目的:探讨Musashi2(MSI2)在胰腺癌上皮细胞间质转化(Epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用及其相关分子机制。研究方法:收集从2012年8月至2016年5月期间于中国医科大学附属第一医院行手术治疗并具有完整临床病理学参数及术后随访资料的胰腺癌标本43例,其中男性27例,女性16例,年龄29-80岁(中位数58岁),术后病理均证实为胰腺导管腺癌。采用免疫组化检测胰腺癌组织中MSI2,ZEB1及ZO-1的表达强弱,统计分析三者在胰腺癌组织水平上的表达强弱及其与临床病理学参数之间的关系。统计分析MSI2,ZEB1及ZO-1胰腺癌组织水平上的相关关系。应用CRISPR-Cas9技术于Capan-2,SW1990胰腺癌细胞系中构建MSI2稳转沉默细胞系。应用免疫印迹法和免疫沉淀方法探讨在胰腺癌细胞水平上MSI2与EMT关键蛋白之间的表达相关关系。应用卡方检验,Wilcoxon秩检验,Pearson相关系数法,Kaplan-Meier单因素分析,Log-Rank检验等统计学方法进行统计学分析。结果:免疫组化结果显示MSI2及ZEB1主要在细胞质及细胞核中表达,ZO-1主要呈细胞膜表达。MSI2,ZEB1及ZO-1在胰腺癌组织中高表达率分别为65.1%(28/43),62.7%(27/43)和39.5%(17/43)。MSI2高表达与胰腺癌组织大小呈正相关(r=0.306,p=0.045),而与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度,淋巴结转移等无关。单因素分析显示MSI2高表达者较低表达者预后差(x2=7.750,p=0.005),ZO-1低表达者较高表达者生存预后差(x2=9.520,p=0.002),MSI2及ZEB1均高表达者较均低表达者预后差(x2=7.212,p=0.007),MSI2高表达且ZO-1低表达者较MSI2低表达且ZO-1高表达者预后差(x2=10.610,p=0.001)。相关性分析显示胰腺癌组织中MSI2与ZEB1表达正相关(r=0.547,p=0.000),与ZO-1呈负相关(r=-0.506,p=0.001)。在Capan-2和SW1990胰腺癌细胞中,免疫印迹法显示MSI2沉默的细胞中ZEB1表达降低同时ZO-1表达增加,免疫沉淀提示MSI2和ZEB1蛋白在胰腺癌细胞中存在蛋白相关结合。结论:胰腺癌组织及细胞水平中,MSI2与ZEB1表达呈正相关,与ZO-1表达呈负相关,提示MSI2可通过调控ZEB1及ZO-1表达促进胰腺癌EMT的进程。
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