镍精炼尘致NIH/3T3细胞毒性作用的实验研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:forsoother
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目的:研究镍精炼工人接触镍精炼尘的生物学效应。以我国某镍精炼公司镍精炼尘为受试物,处理小鼠正常的肺成纤维细胞(NIH/3T3细胞),观察其对细胞形态学改变的影响,检测其对细胞的毒性。  方法:取对数生长期的NIH/3T3细胞,以某镍精炼公司镍精炼尘为受试物,以终浓度分别为100.00μg/mL、50.00μg/mL、25.00μg/mL的毒液染毒。同时设阴性对照组和空白对照组,阴性对照组中加入等体积PBS液,空白对照组为不加细胞的培养液。培养24h后,在倒置显微镜下观察细胞形态并拍片记录。  以NIH/3T3细胞作为靶细胞,以某镍精炼公司镍精炼尘为受试物,以终浓度分别为6.25μg/mL、12.50μg/mL、25.00μg/mL、50.00μg/mL和100.00μg/mL进行染毒,同时设阴性对照组和不加细胞的空白对照组,每组均设8个重复孔。分别培养24h。于作用时间结束前4h每孔弃去培养液,加入50μLMTT溶液,5%CO2培养箱孵育4h。倒置显微镜下观察细胞形态,随机拍摄。  以NIH/3T3细胞作为靶细胞,以某镍精炼公司镍精炼尘为受试物,以终浓度分别为6.25μg/mL、12.50μg/mL、25.00μg/mL、50.00μg/mL和100.00μg/mL进行染毒,同时设阴性对照组和不加细胞的空白对照组,每组均设8个重复孔。分别培养6h、12h、24h、48h后选用利用噻唑蓝(MTT)比色的方法检测镍冶炼尘对NIH/3T3细胞生长的抑制作用,在酶标仪490nm波长下测定各孔吸光度值,按公式间接计算出细胞相对存活率及抑制率,并以改良寇式法计算出细胞生长半数抑制浓度IC50。  结果:研究结果显示,一、受试物在一定浓度下作用一定时间会使细胞形态发生改变;二、在不同浓度下,作用一定时间,细胞的生长均受到抑制,且随作用时间增长,受试物浓度增加,细胞抑制作用增加,呈现出时间-反应关系和剂量-反应关系,而且细胞在形态学上也出现不同程度的改变。  结论:镍冶炼炉前沉降尘能使细胞发生坏死,并且能够使NIH/3T3细胞的生长受到抑制。
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