研究背景马凡综合征(Marfan syndrome, MFS, OMIM154700)是一种常染色体显性遗传病,可累及心血管、骨骼、眼部等多个结缔组织系统。原纤维蛋白-1基因(Fibrillin-1gene, FBN1)是MFS的最常见的致病基因包括。目前共发现大于1750种FBN1基因突变可以导致MFS,突变的位点随机分布在整个FBN1基因中,没有明显的热点突变。每一位FBN1基因携带者都有可能发生严重心血管病变、骨骼累及和眼部病变。MFS患者的表型复杂,变异性大,基因型表型之间的联系不明确。研究目的通过筛查中国人群的FBN1基因突变谱,探索致病突变基因型与MFS表型的关系。研究方法研究纳入在阜外心血管病医院收集的马凡综合征家系的先证者和散发病例,共55例,纳入的研究对象间无血缘关系。纳入120例无血缘关系的正常人作为对照组。应用直接测序的方法检测FBN1基因突变位点,采集患者临床资料,进行基因型表型分析。研究结果本研究共筛查出FBN1基因突变30个,其中首次报道的新突变26个,FBN1基因突变检出率为54.5%(30/55)。符合Ghent诊断标准的马凡综合征患者的FBN1基因突变检出率为71.8%(28/39)。120例对照组成员均未发现以上FBN1基因突变。所有检出FBN1基因突变中错义突变16个,无义突变12个,移码突变2个。93.3%的患者累及心血管系统(28/30),其中符合心血管系统主要诊断标准的有21例(21/28)；93.3%的突变携带者有骨骼系统的异常累及(28/30),其中15例患者符合主要诊断标准(15/28)；66.7%的基因突变携带者有眼部累及(20/30),9例有晶状体异位。基因型-表型研究发现：FBN1基因突变携带者累及心血管系统和骨骼系统的比例显著高于眼部(两组比较的P值均等于0.021)；FBN1基因突变携带者符合心血管系统主要诊断标准的比例显著高于符合眼部主要诊断标准的比例(70.0%VS.30.0%, P=0.004);位于FBN1基因半胱氨酸区域的突变携带者发生晶状体脱位的比例显著高于不位于半胱氨酸区域携带者(100.0%VS.19.2%,P=0.008)；提前终止密码子(Premature termination codon, PTC)突变携带者符合心血管系统主要诊断标准的比例显著高于非PTC突变携带者(92.9%VS.50.0%,P=0.017)。结论我们的研究拓展了中国人群的FBN1基因突变谱,筛查出30个FBN1基因突变位点。基因型-表型研究结果表明,FBN1基因突变携带者累及心血管系统和骨骼系统的比例显著高于眼部；位于FBN1基因半胱氨酸区域的突变携带者发生晶状体脱位的比例显著高于不位于半胱氨酸区域携带者；PTC突变携带者的主动脉瘤和/或主动脉夹层的发生率显著高于其它类型突变携带者。对MFS患者进行早期基因诊断,根据携带的FBN1基因突变类型预测其表型,可以及时监测疾病的发生和进展,防止严重病变的发生,对于MFS的防治有重要的意义。研究背景马凡综合征(Marfan syndrome, MFS, OMIM#154700)是一种常见结缔组织疾病,呈常染色体显性遗传。典型的马凡综合征可累及骨骼、眼部和心血管等多个系统。MFS最常见的致病基因为定位于染色体15q21.1的原纤维蛋白基因-1(fibrillin-1gene, FBN1).2型马凡综合征(type2Marfan syndrome, MFS2, OMIM#154705)由转化生长因子2型受体(transforming growth factor beta receptor Ⅱ gene, TGFBR2)基因突变导致。TGFBR2是转化生长因子基因家族的重要成员之一,编码跨膜蛋白激酶受体参与转化生长因子β (transforming growth factor beta, TGF-p)配体家族的信号转导。TGFBR2基因突变和MFS2之间确切的基因型—表型关联还没有明确。研究目的本研究报道了一个中国2型马凡综合征家系的临床特征和致病基因筛查结果。同时探索了TGFBR2基因F-螺旋区域突变和和突变携带着临床表型之间的关系。研究方法本研究纳入研究对象为在阜外心血管病医院门诊收治的患有MFS的先证者和其所有家系成员。共纳入100个无血缘关系的正常人作为对照。入选病例(先证者、家系成员)和对照组成员均经详细询问病史、体格检查及常规检查。我们提取了研究对象外周血基因组DNA,使用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增目的片段,对FBN1基因和TGFBR2基因的编码区进行了直接测序。使用了SWISS-MODEL工具建立TGFBR2蛋白3D模型,预测TGFBR2基因突变所造成的影响,并对同一功能域的TGFBR2突变进行了基因型和表型关联分析。研究结果先证者可以确诊为2型马凡综合征。在先证者及家系成员中发现一个新的TGFBR2基因错义突变p.V453E (c.1358T>A),这个突变位于TGFBR2的激酶结构域的F-螺旋。TGFBR2基因V453E突变使疏水性缬氨酸被亲水性的谷氨酸取代,形成了额外的氢键,从而改变了的F-螺旋的结构,影响了TGFBR2的蛋白质的结构和功能,表现为突变携带者的是2型MFS表型。文献回顾和基因型-表型分析发现,93.8%的F-螺旋基因突变携带者(15/16)有符合主要诊断标准的心血管累及,只有4例有眼部的轻微累及(4/16,25%),所有携带者均没有晶状体异位。F-螺旋基因突变携带者心血管系统和骨骼系统受累及的比例显著高于眼部(两组比较的P值均小于0.01)所有突变携带者中,37.5%的患者(6/16)可以诊断为2型MFS,但是只有12.5%的患者(2/16)完全符合Ghent诊断标准。结论本研究在2型马凡综合征的家系中发现了1个新的TGFBR2基因突变p.V453E(c.1358T>A)。携带TGFBR2基因F-螺旋区域突变的患者更容易出现严重的心血管事件和骨骼病变。携带此区域基因突变的患者更容易在年轻时出现严重的临床表型。携带F-螺旋TGFBR2基因突变的患者的眼部病变发生率较低。这些发现对2型马凡综合征以及其他TGF-β通路相关疾病的基因检查、诊断和治疗有重要意义。研究背景糖尿病是一种影响人类健康的重要疾病。糖尿病和心血管疾病联系紧密,常伴有甘油三酯水平升高,低密度脂蛋白胆固醇水平升高及高密度脂蛋白胆固醇水平降低等血脂异常,可引起内皮功能障碍。内皮功能障碍是心血管疾病的独立危险因子之血流介导的血管舒张反应(flow-mediated dilation, FMD)是应用超声测量一氧化氮介导的血管舒张反应,在临床上应用广泛的内皮功能检测方法。临床研究显示,FMD值降低与糖尿病,胰岛素抵抗,高胆固醇血症,高血压,高龄,肥胖等多种心血管疾病危险因素相关。体外研究和临床研究认为,他汀类药物(Statins)具有改善血管内皮功能的作用。而对于他汀类药物是否可以改善糖尿病患者的血管内皮功能,临床研究的结论不一,存在着争议。因此,非常有必要重新评估他汀类药物对糖尿病患者血管内皮功能的影响。研究目的本临床荟萃分析归纳了目前为止所有纳入糖尿病患者的随机、双盲、安慰剂对照试验,观察他汀类药物治疗一段时间后,患者血管内皮功能(FMD值)的变化,以明确他汀类药物治疗是否可以改善糖尿病患者的血管内皮功能,同时探索其影响因素,为他汀类药物在糖尿病患者的合理应用指明方向。研究方法根据Cochrane干预试验系统评价手册和QUORUM指南,对研究他汀类药物对糖尿病患者血管内皮功能的临床干预实验进行荟萃分析。研究者首先对PubMed、 Cochrane library、 Embase数据库和相关资料进行系统检索。应用随机效应模型(random-effect models),以加权平均差(weighted mean difference, WMD)计算他汀类药物干预前后FMD变化值。为探索影响效应的试验因素,根据纳入实验研究对象的基本特征进行了亚组分析及Meta回归分析(meta-regression analyses)。研究结果Meta分析纳入了10个随机安慰剂对照研究(randomized and placebo-controlled studies, RCT)以分析他汀类药物对糖尿病患者内皮功能的改善作用,包括487名他汀类药物作为干预组的糖尿病患者和358名使用安慰剂的对照组患者。荟萃分析结果显示他汀类药物可以显著改善糖尿病患者的血管内皮功能(WMD:0.94%;95％CI:0.38%,1.50%；P<0.001)。由于纳入研究间存在异质性(x2=27.5;I2:67%:P=0.001),我们进行了亚组分析和Meta回归分析。亚组分析结果显示,他汀类药物可以显著改善BMI≤27.6kg/m2的糖尿病患者的血管内皮功能(纳入5个研究：12：14%；WMD:1.52%;95%CI:1.19%,1.85%;P<0.001),但是对于BMI>27.6kg/m2的患者,他汀类药物对内皮功能无改善作用(纳入5个研究：I2:0%；WMD:0.11%；95%CI:-0.47%,0.70%；P=0.70).同时,他汀类药物也明显改善了：平均年龄≤55岁、舒张压≤80mmHg、1型糖尿病、基线LDL-c水平≤3.32mmol/L.基线甘油三酯水平≤1.56mmol/L和基线HDL-c水平>1.25mmol/L的糖尿病患者的血管内皮功能。Meta回归分析结果与亚组分析结果一致,纳入研究对象的平均年龄、纳入研究对象的BMI指数、纳入研究对象的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)基线水平、纳入研究对象收缩压基线水平和舒张压基线水平为影响Meta分析异质性的原因。结论我们的荟萃分析显示,他汀类药物治疗可以显著改善基础血管内皮功能较好的糖尿病患者的FMD。由于糖尿病患者可以受益于他汀类药物,应谨慎使用FMD评价高危人群的血管内皮功能。同时,我们的荟萃研究对严格控制糖尿病患者的心血管疾病危险因素提供了进一步的证据,应尽早使用他汀类药物干预年老、肥胖、高血压和血脂异常的糖尿病患者,防止其血管内皮功能障碍的发生和发展,以达到最大的治疗收益。