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聚丁二酸丁二醇酯(PBS)是目前世界公认的综合性能最好的生物可降解塑料。相比较其他生物可降解材料,PBS具有成本低,性能好,能非常好的和其他材料进行有效聚合,同时其性能介于聚乙烯和聚丙烯之间,因此其工业应用前景非常广泛,具有很好的市场与经济价值。本论文利用实验室保存的能够降解PBS的Pseudomonas sp.DS1001,采用单因素实验和正交试验对菌株的发酵条件进行了优化。同时对Pseudomonas sp.DS1001菌株分泌的解聚酶进行了分离纯化,研究了PBS解聚酶的酶学性质和酶学属性,最终得到以下结论:(1)单因素条件优化结果为:含碳量为0.2%,装液量为150m L/250m L,培养时72h,培养基初始p H为9.0;根据正交试验,Pseudomonas sp.DS1001的最佳产酶条件为:37℃、培养基初始p H 9.0、含碳量为0.25%和装液量为150m L/250m L。酶活提高45%。(2)将发酵的粗酶液通过超滤、DEAE阴离子交换层析两步分离纯化,最终从菌株Pseudomonas sp.DS1001中得到一个分子量约为50KDa的胞外PBS解聚酶纯酶组分。PBS解聚酶的最适反应温度为50℃,在4~50℃以内均具有很好的热稳定性;PBS解聚酶的最适反应p H为8.0(Na2HPO4-Na H2PO4缓冲液),在p H4.0~10.0范围内,PBS解聚酶的剩余酶活力达到50%以上;金属离子对PBS解聚酶有重要影响。此外,EDTA、PMSF能强烈的抑制PBS解聚酶活力;PBS解聚酶对有机溶剂有一定的耐受性,但Triton X-100,无论是低浓度还是高浓度均能抑制PBS解聚酶。(3)通过肽质谱分析得知到从Pseudomonas sp.DS1001纯化的PBS解聚酶是一种脂肪酶。纯化的PBS解聚酶对PBS、PHB及PCL等脂肪族聚酯具有一定的降解活性,而不能降解PLA。PBS解聚酶对p-NPC4的催化效果最好。对降解后PBS膜片利用扫描电镜观察,实验结果显示,在PBS解聚酶作用之前PBS膜片表面相对光滑平整,但是在PBS解聚酶的作用下,PBS膜片表面出现明显的蜂窝状孔洞,同时随着降解时间的延长PBS膜片表面孔洞明显变大变深。质谱分析PBS解聚酶降解产物降解产物为丁二酸、丁二酸-丁二醇、丁二酸-丁二醇-丁二酸、丁二酸-丁二醇-丁二酸-丁二醇。