小鼠卵巢Ski表达水平与卵泡发育的相关性研究

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baby3911
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Sloan- Kettering virus gene product (Ski)是细胞核内的原癌蛋白,属于Ski/SnoN原癌基因超家族。Ski在各种细胞类型中发挥着不同的作用。Ski在细胞中的高表达可以诱导原癌细胞癌变和肌肉细胞终末分化。Ski/SnoN是转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路中的重要调节因子,它们以同源或异源二聚体的形式发挥作用,其中异源二聚体的活性比较高。TGF-β超家族在卵泡发育中有很重要的作用,有研究发现,SnoN在KM白小鼠卵巢闭锁卵泡及黄体化过程中表达,Ski在大鼠卵巢闭锁卵泡的颗粒细胞中表达,而其在小鼠卵巢中的功能却还不为人知。因此,本实验的目的在于研究Ski在不同发育时期卵泡中的表达情况,并以此来推断其与小鼠卵泡发育的关系及在卵泡发育及黄体化过程中的生物学功能。我们以新生雌性KM小白鼠,处于各发情周期的雌小鼠及促性腺激素处理的未成熟小鼠卵巢中的卵泡为研究对象,以实时定量PCR和免疫组化作为技术手段,检测Ski在卵泡发育及黄体化过程中的表达情况,进而推断Ski在卵巢中的功能。实验结果显示:在卵泡发育的早期阶段(如原始卵泡装配、原始卵泡向初级卵泡转化过程中),Ski在卵母细胞中呈现阳性表达,其中Ski在卵母细胞核中高度表达。尤其是出生后第一天(postnatal days 1,PD1)小鼠卵巢的卵母细胞核中,Ski表达最高。随着卵泡的发育,颗粒细胞增生并逐渐分化为多层,卵母细胞体积逐渐变大,膜细胞也逐渐从间质细胞中分化出来,卵巢中开始出现小、中型有腔卵泡,而此时Ski的表达位置逐渐从卵母细胞核向卵母细胞核及其核周转移,总表达量逐渐降低。发情周期中,总体上,Ski在发情间期表达最强,发情前期和发情期表达也很明显,发情后期表达相对最弱。激素处理的未成熟卵泡中,随着PMSG、hCG的处理,Ski表达量逐渐减少,其中卵母细胞核周表达很明显,卵母细胞核中很弱。但是在黄体化形成过程中,检测到Ski表达。实时定量PCR结果显示,在卵丘扩张过程中,Ski mRNA的表达方式与排卵相关基因的表达方式相反。随着激素的刺激,卵泡的发育,排卵相关基因的表达量逐渐升高,尤其在hCG处理4小时后,表达量最高。排卵之后,表达量降低。而Ski mRNA的表达量是随着排卵的到来逐渐降低,黄体中也检测到Ski mRNA表达。整个发育过程中,膜细胞、颗粒细胞内均没发现Ski的表达。Ski在卵泡发育,排卵及黄体形成过程中有特殊的表达方式。所以我们推测,Ski在KM小白鼠卵泡发育过程中有重要的作用,尤其对早期的卵泡发育和黄体化过程。
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