猪支原体肺炎是一种猪慢性呼吸道传染病,在世界范围内广泛传播,其发病率高,可使猪的饲料转化率降低,并能引起猪的多种并发病,造成养猪业极大的经济损失。选择优质有效的疫苗对猪群进行预防免疫是控制该病的关键。目前猪支原体肺炎疫苗主要分为灭活疫苗和弱毒活疫苗两类,其中灭活疫苗通过肌肉注射免疫,操作简单,但市场上的灭活疫苗产品多为进口产品,保护力一般,且价格较高昂,而国内研制的灭活疫苗产品多为油包水型,安全性较差；弱毒活疫苗由国内自主研发生产,免疫效果更好,且成本较为低廉,但该疫苗需要通过肺内注射免疫,其操作难度较高,不利于推广。研究目的：为了改进现有的国产猪支原体肺炎疫苗,增强疫苗免疫刺激能力、降低疫苗毒副作用,本试验对猪支原体肺炎疫苗佐剂进行研究,旨在研发出更为优质和安全的佐剂,为开发新型猪支原体肺炎疫苗提供帮助。试验方法：在灭活疫苗佐剂的研究中,主要研制以水为连续相的,具有高效免疫刺激能力的佐剂系统。研究中以水包油乳剂、水性高分子聚合物卡波姆或壳聚糖分别作为基础体系,并向其中分别添加左旋咪唑、黄芪多糖、免疫刺激复合物基质(ISCOM-matirx)、胸腺肽、CpG-ODN或sCpG-ODN,得到不同的佐剂配方,同时选用3种商品化佐剂(GEL01ST、ISA201、ISA11R)进行同步试验评价。将不同佐剂分别与猪支原体肺炎灭活疫苗制成佐剂疫苗免疫小鼠,检测淋巴细胞增殖情况及血清抗体水平,用以比较几种佐剂在用于该灭活疫苗上的免疫增强效果。在活疫苗佐剂的研究中,主要研制能够为猪支原体肺炎活疫苗接受的佐剂,增强疫苗免疫原性实现肌肉注射免疫。研究中以水包油乳剂、水性高分子聚合物卡波姆或壳聚糖分别作为基础体系,并向其中分别添加左旋咪唑、黄芪多糖、免疫刺激复合物基质得到不同的佐剂配方,同时选择GEL01ST进行同步实验评价。将不同佐剂分别与活疫苗直接混合后免疫小鼠,检测淋巴细胞增殖情况及血清抗体水平,用以比较几种佐剂在用于该活疫苗上的免疫增强效果。此外本研究还对所试佐剂进行稳定性研究。试验结果：在对灭活疫苗的研究中,相较于对照组,各佐剂组均有明显的免疫应答反应。其中,卡波姆+ISCOM-matrix佐剂组对增强小鼠淋巴细胞增殖能力及血清抗体分泌水平均为各组间最高,其次为卡波姆+左旋咪唑佐剂组与GEL01ST佐剂组,而卡波姆+胸腺肽佐剂组的血清抗体水平较高,却对淋巴细胞增殖没有明显作用;在对活疫苗的研究中,ISCOM-matrix佐剂组对增强小鼠的淋转效率以及血清抗体水平均为各组最高,其次为水包油左旋咪唑佐剂组,而卡波姆+左旋咪唑+黄芪多糖佐剂组与卡波姆+左旋咪唑高剂量佐剂组虽然能显著促进小鼠淋巴细胞增殖效率,但不能引起高水平的血清抗体反应。在佐剂稳定性的研究中,观察发现自制的水包油体系佐剂具有较好的稳定性;不同型号卡波姆中,卡波姆971P与卡波姆934P较适合用于注射用疫苗佐剂的开发。试验结论：1.本试验在对猪支原体肺炎灭活疫苗佐剂的研究中,卡波姆+ISCOM-matrix佐剂、卡波姆+左旋咪唑佐剂与GEL01ST佐剂三种佐剂有潜力成为猪支原体灭活疫苗佐剂;2.本试验在对猪支原体肺炎活疫苗佐剂的研究中,ISCOM-matrix佐剂与水包油左旋咪唑佐剂两种佐剂在实验剂量下对肌肉注射途径免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力有较强的促进作用,有潜力成为猪支原体肺炎活疫苗佐剂。