苏云金芽孢杆菌P91和B31菌株的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:yanhsy
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本文对从武夷山白玉兰(Magnolia denudata)和立碗藓(Physcomitriumjaponicum)中分离得到的苏云金芽孢杆菌P91和B31菌株的生理生化特性、小菜蛾和棉铃虫的生物测定、编码活性因子的基因分析、工业培养基的室内摇瓶优化筛选进行了较为系统的研究。采用热处理加抗生素及醋酸钠的分离方法,对来自武夷山自然保护区、泰宁状元岩、三明麒麟山、永安桃源洞等地区采集的植物叶片和苔藓样本进行Bt的分离,挑选具有代表性的P91和B31菌株进行系统研究。对P91和B31菌株的生物测定结果表明其对小菜蛾具有较强杀虫效果、对棉铃虫没有防效。对新分离的P91和B31菌株的糖类发酵试验、淀粉水解试验、乙酰甲基甲醇(V.P)试验、脲酶水解试验、七叶灵利用试验、卵磷酯酶试验、精氨酸脱羧酶试验和菌膜形成试验等经典生理生化指标进行了测定。测定结果显示P91菌株与蜡螟亚种(Bacillus thuringiensis subsp.galleriae)(H5ab)的生理生化反应结果最为接近,仅菌膜的结果不一致;B31菌株在生长代谢过程中产生尿酶、卵磷脂酶和精氨酸脱羧酶,可以利用甘露糖、葡萄糖、水杨苷。采用PCR及PCR-RFLP技术对苏云金芽孢杆菌新菌株P91和B31的ICP、Vip、几丁质酶3种活性因子的编码基因进行了分析。结果表明,该菌株含有几丁质酶基因,不含Vip3A基因。以农副产品为主要原料,采用正交试验设计,通过室内摇瓶培养对B31菌株的工业培养基各组分配比进行了初步优化筛选,采用二次正交回归旋转组合设计获得了回归方程,并以回归方程作为优化培养基配方的模板,结合遗传算法,在整个可行空间进行随机搜索,得到培养基配方的最优区间和接近全局最优解的培养基最佳组合。
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