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目的:1.制备载PTX靶向相变脂质纳米粒(PTX-loaded anti-LHRHR targeted phase-change lipid nanoparticles,PTX-anti-LHRHR-PCNPs),检测其物理及化学性质、载药率、包封率、体外释药情况等。2.探讨载紫杉醇靶向相变脂质纳米粒体外细胞寻靶能力及对卵巢癌细胞的杀伤作用。3.观察相变脂质纳米粒(phase-change lipid nanoparticles,PCNPs)体外发生液-气相变的条件及增强超声显影的效果。方法:1.按一定比例分别准确称量DSPE-PEG2000-Biotin、DPPC、DPPA,采用薄膜-水化法和乳化法制备载PTX靶向相变脂质纳米粒。马尔文粒径分析仪检测PTX-anti-LHRHR-PCNPs的粒径和表面电位;透射电镜观察其表面形态;高效液相检测含不同质量的紫杉醇的载PTX相变脂质纳米粒的包封率、载药量和体外释药情况;利用免疫荧光法检测LHRHR抗体是否成功连接到相变脂质纳米粒上。2.共聚焦荧光显微镜观察anti-LHRHR-靶向脂质纳米粒的体外寻靶能力,分为以下几组组:抗体封闭+A2780组(a)、非靶向脂质纳米粒+A2780组(b)、anti-LHRHR-靶向脂质纳米粒+A2780组(d);CCK8法检测载PTX靶向相变脂质纳米粒对细胞活性的影响。3.热致相变过程:在光镜下观察加热板加热的PCNP的液-气相变过程;声致相变过程及超声显像效果:LIFU辐照相变脂质纳米粒,并用超声仪观察PCNP相变后的体外显像情况,探讨最佳LIFU辐照参数。结果:1.载PTX相变脂质纳米乳外观呈乳白色,1000倍光镜下观察,纳米粒粒径等大小均一,分散均匀,无聚集。马尔文粒径分析仪测得的粒径大小平均约为508±11.26 nm,电位约为-30.53±6.34mv;透射电镜结果显示载PTX相变脂质纳米粒呈类圆形,大小均一。高效液相结果显示,随着加入的PTX的质量为3mg时,其包封率为及载药量均较高,分别为(85.33±10.31)%、(28.45±3.44)%;观察48小时内载PTX相变脂质纳米粒的体外释药情况,结果显示1h时,LIFU辐照组的紫杉醇释放量可达到50%,而对照组的释放量约为30%,48h时LIFU辐照组的累计释放量达到95%,对照组的累计释放量约为80%,说明在LIFU辐照下可以加快药物的释放。流式细胞仪检测靶向相变脂质纳米粒与FITC的连接率为(85.58±2.01)%。CCK8检测细胞活性,当加入的相变脂质纳米粒的浓度达到1.5mg/ml时,细胞的活性仍不低于80%,表明所制备的相变脂质纳米粒毒性低,具有较好的生物安全性;LIFU+载PTX相变脂质纳米粒组的细胞增殖抑制率最低。2.利用流式细胞仪结果显示LHRH受体阳性的卵巢癌A2780细胞与靶向相变纳米粒的连结率(86.40±2.85)%;共聚焦显微镜明显的观察到大量靶向相变脂质纳米粒紧密结合在卵巢癌A2780细胞膜上。3.加热板加热到38.5℃左右时,光镜下显示相变脂质纳米粒开始发生相变,由小液滴逐渐准变成微气泡,且随着加热温度越来越高,所产生的气泡数逐渐增多,体积也逐渐增大直至破裂;相变脂质纳米粒在体外37℃水浴条件下,LIFU(5w、30min)时开始出现良好的体外显像效果,并随着时间的延长达1小时之久时,体外显影效果仍然较强;结论:1.成功制备了包封率及载药量较高的载PTX靶向相变脂质纳米粒,并且具有较好的体外主动寻靶能力,从而提高肿瘤局部的药物浓度,减少全身副作用的同时达到更好地治疗效果。2.相变脂质纳米粒在特定的条件下能够发生液-气相变,表现为稳定持久的体外显影效果,有望成为一种新型的超声造影剂。