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亚麻(Linum usitatissimumL.)是我国重要的经济作物,有纤维用、油用及保健等多用途。甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)是一种重要的抗旱基因,通过生物表达产生甜菜碱,甜菜碱具有调节细胞渗透压作用,从而提高植物抗旱能力。本研究旨在建立亚麻组织培养再生体系和以BADH为目的基因的农杆菌介导遗传转化体系,为培育转BADH基因抗旱亚麻新品种提供技术支持。主要研究结果如下:
1.通过对4个优良亚麻品种Argos(高斯)、Diane(代安娜)、Ariane(阿里安)、Agathe(阿卡塔)的下胚轴和子叶进行组织培养,确定了以Argos(高斯)的下胚轴为外植体。
2.确定诱导愈伤组织的最适宜培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+LH500mg/L;诱导不定芽分化的最适宜培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L+LH250mg/L:诱导生根的最适宜培养基为:1/2MS+NAA0.3mg/L+IBA0.05mg/L,从而建立了亚麻遗传转化的再生体系。
3.确定了卡那霉素对业麻的下胚轴的致死浓度为60mg/L。
4.分析了不同浓度的头孢霉索(Cef)、羧苄青霉素(Carb)和氨苄青霉素(Amp)对愈伤组织诱导率影响。结果表明氨苄青霉素和羧苄青霉素适宜用作抑菌剂,而头孢霉素(Cef)对下胚轴再生的影响较大,不适宜做抑菌剂。
5.头孢霉素(Cef)、羧苄青霉素(Carb)和氨苄青霉素(Amp)浓度低于600mg/L时,尚不能抑制农杆菌的生长。