狗胃动素受体在胃肠道表达的比较

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Q实验背景:胃动素受体(motilin receptor,MTLR)是一种G蛋白偶联受体(G-proteincoupled receptor,GPR),并且已经明确为GPR38。胃动素在消化间期释放入血,与MTLR结合可以引起胃肠移行性复合肌电运动(migrating motorcomplex,MMC)Ⅲ相的发生,促进消化间期肠内容物的推进;目前,MTLR已被用于临床药物的作用靶点,因此研究MTLR的分布、结构和功能对于治疗胃肠动力疾病(比如肠梗阻、肠易激综合征、功能性消化不良等)具有潜在的临床应用价值。实验目的:研究狗MTLR在胃肠道的分布并对其表达强度进行比较。实验方法:1.用S-P免疫组织化学方法检测MTLR在狗整个胃肠道各部位的表达;2.用RT-PCR方法检测MTLR mRNA在狗整个胃肠道各部位的表达。实验结果:1.S-P免疫组织化学染色在狗胃窦、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠、中端结肠的肌间神经纤维和肠肌间神经丛发现MTLR的阳性表达,细胞膜出现棕黄色或者棕褐色颗粒,远端结肠的肌间神经纤维和肌间神经丛未发现MTLR的表达,整个胃肠道的环形肌和纵形肌均未发现MTLR的阳性表达,各部位MTLR的染色强度依次为:十二指肠→回肠→空肠→近端结肠→胃窦→中端结肠→远端结肠;2.RT-PCR检测到狗胃窦、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠和中端结肠MTLR mRNA的表达,远端结肠未检测到其表达,MTLR mRNA的表达量依次为十二指肠→回肠→空肠→近端结肠→胃窦→中端结肠→远端结肠,这与我们的免疫组织化学染色结果一致。实验结论:1.免疫组化方法证实:狗MTLR只分布于除远端结肠以外整个胃肠道的肌间神经纤维和肠肌间神经丛;2.免疫组化和PCR方法均证实:狗MTLR在胃窦、十二指肠、空肠、回肠、近端结肠、中端结肠表达,表达强度依次为:十二指肠→回肠→空肠→近端结肠→胃窦→中端结肠→远端结肠3.上述实验提示:MTLR在不同物种胃肠道的分布具有特异性。
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