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目的：1、本文通过检测宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)患者宫颈上皮脱落细胞中人端粒酶mRNA基因(human telomerase mRNA component gene, hTERC)的表达及人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)亚型的感染情况,分析hTERC基因扩增、不同HPV亚型感染、CIN三者之间的关系。2、将hTERC基因检测与HPV亚型检测及薄层液基细胞学(thinprep cytologic test,TCT)检查进行比较,探讨hTERC基因检测在CIN诊断及预测中的价值。3、对行微创治疗的CIN患者用hTERC基因检测、HPV亚型检测及TCT检查进行随访,探讨hTERC基因检测在CIN保守治疗后随访中的价值。方法：选择2008年4月～2009年4月就诊于济南军区总医院妇科的90例患者,所有患者均行组织病理学检查并以组织病理学为最终标准,分为：阴性对照组即慢性宫颈炎组20例；阳性对照组即宫颈鳞癌组(squamous cell carcinoma, SCC) 36例；研究组34例,其中CINⅠ级8例、CINⅡ级9例、CINⅢ级17例。CINⅠ级和CINⅡ级患者均行宫颈环形电刀切除术(loop electrical excision procedure, Leep)治疗。17例CINⅢ级患者中8例行Leep锥切术,9例行全子宫切除术。对Leep治疗后切缘为阳性的患者再次行扩大的Leep治疗,直至切缘为阴性。各组患者治疗前刷取宫颈脱落细胞,用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技术检测hTERC基因的表达、导流杂交基因芯片(flow-through hybridization and gene chip, FHGC)技术检测HPV亚型,同时行TCT检查。对25例行微创治疗的CIN患者,随访6个月,于治疗后第6个月时再次采取患者宫颈脱落细胞行hTERC基因检测、HPV亚型检测、TCT检查,必要时行电子阴道镜下宫颈活检。结果：1、不同病理类型中hTERC基因的表达情况：随着病理级别的升高,hTERC基因异常扩增细胞百分比升高(p<0.01); hTERC基因阳性表达率升高,阳性表达强度升高,阴性及强阳性表达所占比例各组间比较有显著的统计学差异(均p<0.01)；hTERC基因高拷贝类型(2：4型、4：4型)所占的比例越大(均p<0.05),2：3拷贝类型所占比例升高(p<0.01),2：2拷贝类型所占比例下降(p<0.01)2、CIN治疗前后hTERC基因的表达情况：CIN治疗后hTERC基因异常扩增细胞百分比较治疗前明显降低,差异有显著的统计学意义(p<0.01)；治疗前以阳性表达为主,治疗后以阴性表达为主,而且治疗后强阳性表达率较治疗前明显降低,差异有显著的统计学意义(p<0.01)；治疗前依次以2：3、2：4、4：4、2：2拷贝类型为主,而治疗后依次以2：2、2：3拷贝类型为主,2：2拷贝类型所占比例较治疗前明显升高,差异有显著的统计学意义(p<0.01),2：4拷贝类型所占比例较治疗前降低,差异有统计学意义(p<0.05)。3、不同病理类型中及CIN治疗前后HPV感染情况：本研究中CINⅡ组、CINⅢ组、SCC组均以HPV16型感染为主,CINⅠ组以HPV阴性及其他类型感染为主,慢性宫颈炎以HPV阴性为主。随着病理级别的升高HPV阳性率、HPV16型阳性率逐渐增高,差异均有显著的统计学意义(p<0.01)；CIN治疗后HPV阳性率较治疗前明显下降,差异均有显著的统计学意义(p<0.01)。4、hTERC基因检测结果与HPV检测结果比较：不同的HPV亚型感染导致hTERC基因扩增情况不同,HPV16型阳性、其他高危型阳性、阴性／低危型阳性组中hTERC基因扩增率分别为：90.38%、66.67%、28.13%,各组间比较有显著的统计学差异(P<0.01),HPV16型阳性组中hTERC基因阳性率最高。5、hTERC基因检测结果与TCT结果、CIN治疗前后TCT结果比较：随着TBS分级的升高,hTERC基因阳性表达率逐渐增高,差异有显著的统计学意义(P<0.01),TCT结果正常组hTERC基因阳性表达率为0.00%,SCC组hTERC基因阳性表达率为97.12%,ASCUS组hTERC基因阳性表达率为66.67%；CIN治疗后TCT结果阳性率较治疗前明显降低,差异有显著的统计学意义(P<0.01)。6、hTERC基因检测、HPV亚型检测、TCT检查三种检测方法比较：hTERC基因检测的特异度(即实验判定为阴性的人数与真正无病人数的比值)、灵敏度(即实验判断为阳性的人数与真正的病人数的比值)分别为100.00%、85.71%,综合评价效果优于TCT检查、HPV检测,可弥补TCT检查灵敏度差、HPV检测特异度差的缺点。结论：1、hTERC基因在慢性宫颈炎组中无表达,随着病变程度的加重,hTERC基因阳性表达率、异常扩增细胞所占百分比均升高；hTERC基因阳性表达强度加强、高拷贝类型所占比例增高。提示：hTERC基因异常扩增可能是宫颈癌形成的早期事件,在宫颈癌变的过程中hTERC基因起着重要作用,其可作为CIN筛查的分子标志。hTERC基因扩增程度与病变程度呈正相关,其扩增提示CIN有恶性进展潜能,其扩增情况可作为CIN病情进展的预测指标。2、FISH技术检测hTERC基因的特异度、灵敏度均较HPV亚型检测、TCT检查高,而且FISH技术有客观性好、重复性好、无创等优点,可弥补TCT灵敏度差、HPV特异度差的缺点,作为目前临床“三阶梯”及HPV检测以外的有力检测方法,并可指导临床对CIN的适当治疗。3、不同HPV亚型致病性不同,HPV16型感染与CIN及宫颈癌的发生有密切关系。高危型HPV(特别是HPV16型)感染更易导致hTERC基因扩增。4、采用FISH技术检测宫颈脱落细胞中hTERC基因表达对预测CIN复发或进展有重要参考价值,其可作为CIN保守治疗后的一种随访手段。治疗前hTERC基因阳性表达的CIN患者病变复发、进展的风险较高,应密切随访。