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本文通过研究抽提条件对赤魟软骨组织的抽提产率的影响以及不同层析条件对赤魟软骨血管生成抑制因子的分离效果的影响,确定了制备高纯度赤魟软骨血管生成抑制因子的纯化工艺,并通过胶原酶模型、CAM模型验证其生物学活性。
正交实验确定了赤魟软骨组织在温度30℃、pH6.2、摇床振荡速度100r/min、抽提72h条件下,抽提产率最高,可达0.84﹪,抽提产物的25~35﹪丙酮分级沉淀组分的CAM血管生成抑制率达85﹪。
优化离子交换层析、凝胶过滤、反相层析的条件,可进一步有效的获得高纯度的赤魟软骨血管生成抑制因子-I(DCAIF-I)。SDS-PAGE-考马斯亮蓝染色显示为一条带,分子量约为62kDa。活性验证结果表明,DCAIF-I对胶原酶具有一定的抑制活性,对CAM血管生成抑制活性具有一定的浓度与时间依赖性。
另外,还研究了赤魟软骨黏多糖的降血脂和抗凝血活性。赤魟软骨黏多糖能显著降低高脂家兔血清的TC、TG和LDL-C含量,提高HDL-C含量,并具有延长家兔全血的凝血时间的功效。