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番茄斑萎病毒属病毒(tospoviruses)是全球范围内广泛分布、引起多种作物病害的具有经济重要性的病毒。本研究选择病毒粒体装配与运动两个致病的重要环节,综合应用改进的负染色制样、超薄切片、免疫胶体金标记、高压冷冻电镜制样的方法,对自然感染tospoviruses及人工接种番茄斑萎病毒(TSWV)、番茄环纹斑点病毒(TZSV)的寄主植株样品中病毒粒体的装配与运动机制开展了较为系统的研究。发现tospoviruses侵染寄主细胞中都诱导产生特殊囊泡。囊泡的形态主要有环形、球形、管状、出芽型和有尾型5种,大小从50nm至1000nm不等,80%以上为300nm至600nm。部分囊泡中包含有未成熟及成熟的病毒粒体。这是首次发现负单链RNA植物病毒诱导寄主细胞产生囊泡。发现tospovriuses侵染的寄主植物细胞中病毒粒体的装配发生于4个部位:高尔基复合体平行膜及囊泡内,内质网膜系统的内质网膜和囊泡内,病毒原质(VP)内,丝状内含体(FI)内。病毒粒体装配成熟后,其聚集形式有单颗粒(SPA)、双颗粒(DPA)、三颗粒(TPA)和多个颗粒(MPA)4种聚集方式,多聚集于囊泡中。发现tospoviruses病毒粒体在细胞内运动有3种方式:1)单个病毒粒体沿着内质网膜运动;2)包裹病毒粒体的囊泡沿着内质网膜运动;3)包裹病毒颗粒的囊泡与其他囊泡协同作用在细胞液泡中从一端运动到另一端并向细胞壁附近聚集。发现TSWV、TZSV的运动相关蛋白NSm、致病相关蛋白NSs、糖蛋白Gn 3种蛋白均可定位于细胞壁上,结合常规超薄切片和高压冷冻电镜制样观察,推测tospoviruses在寄主细胞间的运动可能是一种新的植物病毒运动途径,即由囊泡携带病毒穿过细胞壁到达相邻的细胞。综上所述,本研究发现负单链RNA植物病毒tospoviruses侵染寄主植物诱导产生特殊囊泡,这些囊泡对病毒粒体在寄主细胞中的装配、成熟和聚集起到调节作用,在病毒粒体的细胞内运动中起重要作用,并可能参与病毒粒体的细胞间运动,关于具体的调节机制还需要功能互补验证及活体细胞实验加以阐明。