不同生长阶段尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼ghr1和igf1的表达分析

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:drink_xo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
动物生长受到生长轴的调控,生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子1(IGF1)是生长轴中的重要组成成分,其基因表达水平与生长密切相关,是研究生长和生产性状的候选基因,罗非鱼(Oreochromis spp)是重要的世界性养殖鱼类。本试验开展为期200天的罗非鱼生长对比试验,并利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, Q-PCR)技术对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)生长过程中肝脏和肌肉gh订和妒的表达水平进行了检测,为进一步阐述罗非鱼生长轴基因表达机制、利用分子手段对罗非鱼进行选育等工作提供理论依据。以β-actin为内参基因,建立了以SYBR Green染料为荧光指示剂的罗非鱼ghr1和igf1的Q-PCR实验平台。实验构建了含有ghr1,igf1和fl-actin特异性片段的标准质粒作为标准品,5倍梯度稀释后以3次平行重复进行Q-PCR扩增,根据所得到的标准曲线和Ct值计算三个基因的拷贝数,以β-actin为看家基因校对,最终确定ghr1和igf1的相对表达量。结果表明:ghr1, igf1和β-actin标准曲线相关系数为0.999,0.993,0.998,线性和扩增效率良好;扩增产物熔解曲线平滑,为单一峰,没有非特异性产物和引物二聚体生成;对尼罗罗非鱼肝脏和肌肉组织进行初步检测后发现,结果重复性好,数据处理简单,结果可靠,能够用于后续的实验研究。利用构建好的Q-PCR实验平台跟踪尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼在不同生长阶段(0、20、40、60、80、125、145、165、185、205天)肝脏和肌肉ghr1,igf1表达的发育性变化。结果表明:实验鱼的体重增长可以分为快速生长期和平稳期,在0-40天和145~165天时体重增长较快,40~145天时较缓。两种罗非鱼肝脏ghrJ1和igf1表达水平0-40天和145~165天时高于40~145天,表达情况与体重增长趋势基本吻合,暗示尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼肝脏中ghr1和igf1的表达水平的差异是影响生长速度的重要原因之一。肌肉ghr1的表达规律与肝脏中类似,但滞后于肝脏ghr1的表达约1个采样周期,提示劝r1表达有组织特异性。相比肝脏,两种罗非鱼肌肉中igf1 mRNA含量要低到2个数量级,且表达模式与肝脏ghr1和igf1、肌肉ghr1不同,提示肌肉igfl表达有其自身规律.尼罗罗非鱼肌肉igfl总体呈上升趋势,奥利亚罗非鱼没有明显趋势,二者表达模式不相同,两种罗非鱼肌肉中IGF1的自分泌调控机制可能有差异。
其他文献
通过两年制专项选修课的教学,大学生专项技术及理论知识和身体素质有了很大提高.教学前后各项指标相比较,有显著性差异(P<0.05或P<0.01).可见,两年制专项课教学对提高大学生体
该研究为农业部课题"北方地区锯缘青蟹大规模人工养殖"(课题编号95-C-96-05)的主要部分之一,对北方沿海地区青蟹生长规律进行了较为系统的研究,提出将整个养殖期划分为幼解蟹
本试验通过2011和2012两年的田间调查,初步研究了棉盲蝽对12个不同棉花品种的选择偏好性及其种群总体发生动态。调查发现,华北地区棉田主要盲蝽种类为中黑盲蝽Adelphocoris s
该文通过杭州湾及其邻近海域环境调查的结果,以此为基础分析了杭州湾及其邻近海域的环境特征,并按照水质环境、富营养化、浮游生物、底栖生物、海洋微生物及其邻近海域长江口
作者在对青岛沿海定置网渔业作广泛调查的基础上,运用玻璃钢渔船设计建造的新技 术、新规范,对定置网渔般进行了合理的船型改造设计.首先,作者分析了青岛市定置网渔业生产情
该论文研究了十四株海洋微藻的总脂含量和脂肪酸组成,筛选出EPA,AA,PUFA含量高或生长迅速的四株红藻,二株隐藻,对它们的细胞繁殖速率,总脂含量,脂肪酸组成进行了不同条件下的
从杂色鲍肝胰脏中提取褐藻酸裂解酶,用于酶解冷冻海带成熟孢子体,可以得到游离的单细胞.再结合使用阳离子型去污剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),能有效去除多糖的污染,且从单
在体均重(2.35±0.20)g的团头鲂鱼种基础饲料中分别添加0.600、2400、2400和4200u/kgA纤维素酶,制成A、B、C、C和D五组饲料,其中A、B、C、D中加入的纤维素酶都经过适当的体外
黑素皮质素受体(melanocortin receptor, MCR)是黑素细胞皮质激素(melanocortin,MC)发挥功能的重要调控受体,是一种小的G蛋白偶联受体(GPCR),具有7个跨膜的α螺旋结构。哺乳
中国拥有丰富的海洋渔业资源,海洋渔业对我国海洋经济的发展起着举足轻重的作用,近30年来我国的海洋渔业进入爆发式增长,但同时也伴随着掠夺性地捕捞,使海洋渔业资源陷入了日