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动物生长受到生长轴的调控,生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子1(IGF1)是生长轴中的重要组成成分,其基因表达水平与生长密切相关,是研究生长和生产性状的候选基因,罗非鱼(Oreochromis spp)是重要的世界性养殖鱼类。本试验开展为期200天的罗非鱼生长对比试验,并利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, Q-PCR)技术对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)生长过程中肝脏和肌肉gh订和妒的表达水平进行了检测,为进一步阐述罗非鱼生长轴基因表达机制、利用分子手段对罗非鱼进行选育等工作提供理论依据。以β-actin为内参基因,建立了以SYBR Green染料为荧光指示剂的罗非鱼ghr1和igf1的Q-PCR实验平台。实验构建了含有ghr1,igf1和fl-actin特异性片段的标准质粒作为标准品,5倍梯度稀释后以3次平行重复进行Q-PCR扩增,根据所得到的标准曲线和Ct值计算三个基因的拷贝数,以β-actin为看家基因校对,最终确定ghr1和igf1的相对表达量。结果表明:ghr1, igf1和β-actin标准曲线相关系数为0.999,0.993,0.998,线性和扩增效率良好;扩增产物熔解曲线平滑,为单一峰,没有非特异性产物和引物二聚体生成;对尼罗罗非鱼肝脏和肌肉组织进行初步检测后发现,结果重复性好,数据处理简单,结果可靠,能够用于后续的实验研究。利用构建好的Q-PCR实验平台跟踪尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼在不同生长阶段(0、20、40、60、80、125、145、165、185、205天)肝脏和肌肉ghr1,igf1表达的发育性变化。结果表明:实验鱼的体重增长可以分为快速生长期和平稳期,在0-40天和145~165天时体重增长较快,40~145天时较缓。两种罗非鱼肝脏ghrJ1和igf1表达水平0-40天和145~165天时高于40~145天,表达情况与体重增长趋势基本吻合,暗示尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼肝脏中ghr1和igf1的表达水平的差异是影响生长速度的重要原因之一。肌肉ghr1的表达规律与肝脏中类似,但滞后于肝脏ghr1的表达约1个采样周期,提示劝r1表达有组织特异性。相比肝脏,两种罗非鱼肌肉中igf1 mRNA含量要低到2个数量级,且表达模式与肝脏ghr1和igf1、肌肉ghr1不同,提示肌肉igfl表达有其自身规律.尼罗罗非鱼肌肉igfl总体呈上升趋势,奥利亚罗非鱼没有明显趋势,二者表达模式不相同,两种罗非鱼肌肉中IGF1的自分泌调控机制可能有差异。