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目的:阐释白杨素(chrysin,ChR)及其新型合成类似物8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxy chrysin,BrMC)通过抑制DNA甲基转移酶1(DNA Methyltransferase 1,DNMT1)活性,从而减弱或消除肝癌干细胞样细胞(liver cancer stem-like cells,LCSLCs)特性作用机制。方法:体外培养人肝细胞癌SMMC-7721细胞系细胞。干细胞条件培养基悬浮培养法获得SMMC-7721细胞系第2代球细胞,用作LCSLCs。首先,流式细胞术、球形成试验、创口愈合试验、Transwell小室细胞侵袭试验对比分析SMMC-7721细胞和LCSLCs的CD133~+细胞百分率、自我更新、体外致癌性、迁移、侵袭能力。qRT-PCR分析干细胞表面标志物CD133、CD44、ALDH1、ABCG2和多能性转录因子蛋白Bmi1、OCT4、Sox2、Nanog mRNA表达。其次,DNA甲基转移酶活性检测试剂盒测定胚肝LO-2细胞、SMMC-7721细胞及LCSCLs的DNMT(DNMT1、DNMT3a和DNMT3b)活性;qRT-PCR和蛋白质印迹分析LO-2细胞、SMMC-7721细胞及LCSCLs DNMT1表达。其三,与ChR(40μM)处理对照,测定BrMC(5、10μM)处理72h对LCSLCs DNMT1活性和干性的影响。其四,测定5’-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-azacytidine,Aza-dC;1、2.5、5μM)处理72h对LCSLCs DNMT1活性和干性的影响。接下来,测定BrMC(10μM)、Aza-dC(5μM)及两者合用处理72h对LCSCLs DNMT1活性和干性的影响。最后,测定ChR(40μM)、Aza-dC(5μM)及两者合用处理72h对LCSLCs DNMT1活性和干性的影响。结果:1.与SMMC-7721细胞比较,SMMC-7721细胞系第2代球细胞CD133+细胞百分率更高,同时,自我更新、迁移、侵袭能力更强,干细胞表面标志物CD133、CD44、ALDH1、ABCG2和多能性转录因子蛋白Bmi1、OCT4、Sox2、Nanog mRNA高表达。2.与胚肝LO-2细胞、SMMC-7721细胞相比,LCSLCs DNMT1活性增高;并且DNMT1活性明显高于DNMT3a、DNMT3b。3.与1%的DMSO处理LCSLCs相比,ChR(40.0μM)和不同浓度BrMC(5.0和10.0μM)显著抑制LCSLCs的DNMT1活性和干性,呈浓度依赖性(P<0.05),并且BrMC作用效价强度高于先导化合物ChR。4.与1%的DMSO处理LCSLCs相比,不同浓度的Aza-dC(2.5、5.0和10.0μM)显著抑制LCSLCs DNMT1活性和干性,呈浓度依赖性(P<0.05)。5.与1%的DMSO处理LCSLCs相比,BrMC(5.0μM)或Aza-dC(5.0μM)显著抑制SMMC-7721细胞系LCSLCs DNMT1活性和干性;BrMC能有效增强Aza-dC抑制LCSLCs DNMT1活性和干性作用。6.与1%的DMSO处理LCSLCs相比,ChR(40.0μM)和Aza-dC(5.0μM)单独处理抑制LCSLCs DNMT1活性和干性;ChR增强Aza-dC抑制LCSLCs DNMT1活性和干性作用。结论:1.ChR和BrMC能有效增强Aza-dC对SMMC-7721源性LCSLC干性和DNMT1活性的抑制作用。2.ChR和BrMC抑制SMMC-7721细胞系LCSLCs干性作用与抑制DNMT1活性相关。