研究背景：缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage HIBD)是新生儿窒息的主要并发症，病情严重，病死率高，常引起新生儿死亡和神经系统发育障碍。因而寻找有效的治疗途径成为新生儿研究的热点之一。近年来大量研究表明：环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c-AMP response element binding protein，CREB)是脑缺血中神经存活的重要的介质，缺血或谷氨酸预处理后，谷氨酸NMDA受体门控的钙离子内流和相继的CaMⅡ-Ⅳ激活引起CREB的磷酸化，细胞应激(例如缺血等)时磷酸化的CREB(phosphorylation of c-AMP response element binding protein，p-CREB)提供了神经保护性作用，因而重新评价兴奋性氨基酸拮抗剂的保护作用具有重要意义。神经节苷脂(monosialotertrahexosylganglioside，GM1)是一种谷氨酸受体过度激活拮抗剂(receptor abuse dependent antagonist，RADA)：不影响谷氨酸受体正常的信号转导，选择性的抑制谷氨酸受体过度激活所致的各种病理生理的改变，多方位针对HIBD，提供神经元保护作用，具有较大的临床应用潜能。缺氧缺血脑损伤中，GM1与CREB的关系还未见相关的报道，本实验就对p-CREB的变化以及GM1影响做一研究，进一步了解GM1的保护作用，为临床治疗新生儿HIE提供一定的理论基础。第四军医大学硕七论文目的:研究新生大鼠缺血缺氧后海一马cAI区p一CREB的变化以及神经节普脂对其的影响，进一步评价(〕Ml的脑保护作用，为临床用药提供理论依据。方法:选用7d龄SD新生仔鼠108只，随机分为3组:假手术对照组(control组，36只)，缺氧缺血组(班组，36只)及缺氧缺血十神经节普脂组(GMI组，36只)。乙醚吸入麻醉后，游离右侧颈总动脉，双线结扎。恢复1h后，置于缺氧舱内，通入8%氧、92%氮的混合气，氧浓度检测仪检测使得氧浓度维持在(8士0.5)%，持续Zh，建立HIBD模型。control组只游离不结扎动脉，GMI组分别于术前30min和术后腹腔注射GMI(30mg瓜g)。各组于模型建立成功后lh、4h、12h、24h、4sh、72h后迅速取脑，4%的多聚甲醛固定1h，经脱水、透明、浸蜡等，制备5协m的冠状石蜡脑片。借助于sABC、TUN卫L方法分别对3组CAI区p一CREB以及神经元凋亡加以检测。结果:1.CAI区p一CREB的表达:Control组新生大鼠CAI区p一CREB免疫反应阳性细胞主要分布在锥体神经元，各时间点之间无明显差异任愁心.05)，基础状态p一CREB的表达用以维持信号转导和神经元的完整性。Hl后CAI区p一CREB的表达一过性升高后迅速下降，与control组相比有明显的差异(P<0.05)。GMI组CAI区P-CREB的表达一过性升高后迅速下降;与Hl组的分布曲线相似，两组相比无明显差异(P>0.05);但是GMI组与controf组相比有明显的差异(p<0.05)。2.CAI区凋亡细胞的变化:Control组偶见凋亡细胞，Hl组4h时，凋亡细胞明显出现，24h时凋亡细胞最明显，后逐渐减少，与control组相比有明显差异(尸<0-05)。应用GMI后，与扭组相比，凋亡细胞数明显减少(尸<0.05)，凋亡细胞变化时程与班组相似，但与conirol相比，仍有统计学意义(尸<0.05)。第四军医大学硕士论文结论:新生大鼠CAI区p一CREB乍要分布在锥体神经元，基础状态下部分CREB处于磷酸化状态，以维持信号转导、确保神经元的完整性。缺血缺氧后海马cAI区p一CREB一过性升高后迅速下降，可能与兴奋性氨基酸的释放时相特点、缺血程度以及海马区神经元的自身特征等有关:应用GMI后一定程度上抑制了神经元凋亡的发生，对CREB的磷酸化无明显影响。这些结果说明:在HIBD中，GMI是临床治疗新生儿缺氧缺血脑病理想用药，其具体的保护机制尚需进一步完善。