论文部分内容阅读
一、研究背景动脉粥样硬化是常见病和多发病,有极高的死亡率。在工业化国家,冠状动脉性心脏病是过早死亡的主要原因,在发展中国家发病率在不断上升。最近研究表明,炎性反应在动脉粥样硬化形成和发展过程中起主要作用。在细胞粘附分子介导下,炎性细胞沿血管内皮滚动、粘附,并渗透到内皮细胞下,分泌释放各种细胞活性物质,引起血管平滑肌细胞增生,形成泡沫细胞,最终导致动脉粥样硬化斑块的形成。ICAM-1和VCAM-1属细胞粘附分子家族,研究表明ICAM-1和VCAM-1心血管病中起重要的作用。胰岛素(Insulin,INS)是最近发现的一个与血管动脉粥样硬化病理生理紧密相关的血管激素。血管内皮是INS作用的重要器官,INS在维持血管内皮正常功能中起重要作用,实验证明在体内高胰岛素血症情况下导致血管内皮细胞ET-1、NO分泌失调,促进了糖尿病(DM)血管并发症的发生、发展,成为动脉粥样硬化的重要因素。高胰岛素血症在动脉粥样硬化形成和发展中是否影响血管内皮细胞粘附分子表达,本研究拟在动物模型和分子水平上对此进行研究,为探索高胰岛素血症在动脉粥样硬化发生机制中提供新的理论依据。二、研究目的1.在动物中观察高胰岛素血症对血管内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响。2.胰岛素对人血管内皮细胞ECV304中ICAM-1、VCAM-1表达的影响。三、研究方法1.以新西兰白兔为模型,建立兔高胰岛素血症,动态检测兔sICAM-1和sVCAM-1含量,用免疫组织化学观察兔血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的表达,同时设立了一组高糖高脂饮食动物模型进行了对比,通过动脉粥样硬化指数间接观察高胰岛素和高糖高脂对粥样硬化形成及发展的进程2.以人血管内皮细胞株ECV304为受试对象,以100nmol/L胰岛素、25mmol/L葡萄糖、200mg/ L氧化低密度脂蛋白和混合培养液作用于人血管内皮细胞株ECV304,用半定量RT-PCR检测ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平,通过Western-blot检测