目的：利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建大肠癌患者与正常人脱落细胞差异表达基因的消减cDNA文库。 方法：选择确诊的大肠癌患者及正常人新鲜便样各15例，收集大肠的脱落细胞；分别提取总mRNA，用Smart技术反转录成cDNA；经过HaeⅢ酶切后将大肠癌患者脱落细胞cDNA分为两组并接上接头，再与过量正常人粪便脱落细胞cDNA进行两轮消减杂交及两轮抑制性PCR，使得差异表达的DNA片段得以富集；PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌JM109构建成差异表达基因的cDNA消减文库；随机挑选阳性克隆进行PCR鉴定。 结果：随机挑选375个阳性克隆进行PCR鉴定，其中有330个克隆有200～800bp的插入片段，证实建库成功。 结论：成功地构建了大肠癌患者与正常人脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库；对20个质粒测序结果经同源性比对分析，其中20个片段源于13个已知基因，2个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列。该cDNA文库的构建对于进一步筛选、克隆大肠癌脱落细胞差异表达基因及其功能研究、大肠癌早期无痛诊断、大肠癌早期诊断基因芯片的研发奠定了基础。