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第一章首先对毛细管电泳基本原理、检测方法以及应用做了简单概述,并详细介绍了目前毛细管电泳的发展现状,对毛细管电泳电化学分离检测的方法做了介绍,重点对毛细管电泳电化学检测在场放大富集方面的应用研究的方法做了说明介绍。 第二章本章我们以自制的微盘电极作为工作电极,采用毛细管电泳-电化学检测的方法实现了多巴胺、色氨酸、酪氨酸、尿酸、半胱氨酸、组胺和抗坏血酸多种物质的分离。重点研究了缓冲液的pH值大小、所需缓冲液浓度的大小、所加电压等分离条件对分离效果的影响。最终确定分离的最佳条件为:浓度为40mmol·L-1的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲液,缓冲液的pH值为8.0,分离电压为10kV,检测电势为1.2 V(vs.Ag/AgCl),进样时间为5s,在此条件下,实现了以上各种物质的分离,重复测定得到多巴胺的回收率为93~102%。 第三章本章同样采用毛细管电泳-电化学检测方法,对酱油中所含的色氨酸进行分析,首先确定了色氨酸标准样品的最佳检测条件,实验最佳条件为:pH值为9.5、浓度为5.00×10-2 mol·L-1的硼砂-NaOH缓冲液,进样10 kV×10 s,分离电压为18 kV,检测电势为1.2 V(vs.Ag/AgCl);在此条件下利得到色氨酸的线性范围分别为7.9×10-6-2.5×10-4 mol·L-1,最低检测限为(S/N=3)为2.0×10-7mol·L-1。根据标准曲线得到样品中所含色氨酸的浓度为3.0 mg·L-1,通过多次重复测定得到该物质的回收率为97~106%。 第四章本章采用毛细管电泳-电化学检测的方法,运用了场放大的技术实现了色氨酸和半胱氨酸的分离检测,通过对各种实验条件的优化选择,确定了实验的最佳条件:pH8.0,40 mmol·L-1的硼砂-硼酸缓冲溶液,进样12 kV×10 s,分离电压为15 kV,检测电势为1.2 V(vs.Ag/AgCl)。在此条件下对5.00×10-8mol·L-1及5.00×10-5 mol·L-1的色氨酸和半胱氨酸进行检测,最终得到色氨酸及半胱氨酸的放大倍数分别为1.75×103、1.92×103倍。 第五章本章介绍对提取的大鼠腹腔肥大细胞的检测,通过利用毛细管电泳-电化学检测实现了大鼠腹腔肥大细胞内谷氨酸的检测。主要方法是采用了CZE柱上衍生的技术,实现了谷氨酸的检测。确定了检测的最佳实验条件为:pH值为9.5、浓度为2.00×10-2 mol·L-1的硼砂-NaOH缓冲液,进样10 kV×10 s,分离电压为15 kV,检测电势为1.2 V(vs.Ag/AgCl),在此条件下得到了该物质的标准曲线,以及最低检测限(S/N=3)为4.0×10-7 mol·L-1。