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目的通过在缺氧条件下靶向ADAM-17的短发夹RNA（shRNA）抑制人MCF-7乳腺癌细胞内解聚素-金属蛋白酶17（A disintegrin and metalloproteinase17，ADAM17）的表达，并观察其对肿瘤细胞体外侵袭和迁移能力的影响，为开辟乳腺癌基因治疗提供一定的理论基础。方法1使用化学缺氧法，加入氯化钴（浓度150Um/L），置37℃、5﹪CO2及饱和湿度的培养箱中培养MCF-7细胞。2合成可以表达针对ADAM17的短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）的干涉载体，使用Lipofenectin2000转染至人MCF-7乳腺癌细胞，用同样方法转染无义序列组和正常组，其中无义序列组加入无义序列的shRNA，正常组加入相等剂量的磷酸盐缓冲液（Phosphate-BufferedSaline，PBS）。3人MCF-7乳腺癌细胞转染培育48h后，Real-time PCR法检测人MCF-7乳腺癌细胞内ADAM17mRNA的表达程度，并筛选出沉默效果最佳的基因。4. Transwell方法检测肿瘤细胞侵袭能力。5细胞划痕实验检测各组细胞迁移运动能力。结果1各组ADAM17mRNA的Ct值均经β-actin矫正，以正常组的表达作为100%。Real-time PCR结果显示，ADAM17mRNA在正常组细胞中高表达，无义序列的shRNA并不能降低这种表达，但特异性的ADAM17-shRNA却可以明显抑制ADAM17mRNA的表达，同正常组或无义序列组比较，差异具有显著性（P<0.05），说明特异性的转染ADAM17-shRNA可抑制人MCF-7乳腺癌细胞表达ADAM17。同时挑选出沉默效果最佳的ADAM17-shRNA-1219用于后续实验。2Transwell结果显示，缺氧条件下正常组的人MCF-7乳腺癌细胞可明显的穿过铺有Matrigel的人工基底膜到达下室，侵袭细胞数量为100.60±5.45个/视野。在无义序列组，到达下室的细胞数量与正常组比较差异无显著性（P>0.05），说明无义序列shRNA并不能使人MCF-7乳腺癌细胞的侵袭能力减弱。但在ADAM17-shRNA转染组，穿过人工基底膜到达下室的人MCF-7乳腺癌细胞数量为37.94±4.97个/视野，与正常组比较差异具有显著性（P<0.05），说明在缺氧条件下特异性ADAM17-shRNA可抑制人MCF-7乳腺癌细胞的侵袭力。3细胞划痕试验结果显示转染48h后，缺氧条件下无义序列组和正常组的划痕已基本长满细胞，而转染组shRNA-ADAM17的细胞划痕依然明显。表明缺氧条件下转染组细胞的迁移速度明显慢于正常组及无义序列组的细胞。结论1针对ADAM17的shRNA可以有效地抑制ADAM17的表达。2在缺氧条件下ADAM17-shRNA抑制肿瘤细胞的侵袭力。3在缺氧条件下ADAM17-shRNA抑制肿瘤细胞的迁移能力。4在缺氧条件下ADAM17在乳腺癌侵袭行为中发挥重要的促进作用，ADAM17有望成为抗乳腺癌侵袭治疗的靶点。