体外循环系统管路肝素—地塞米松复合涂层制备方法及最佳条件的筛选

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随着体外循环技术在临床的应用越来越多,其中肝素涂层技术在体外循环中的作用也越来越被人们所重视,涂层技术可以可以大大提高管路系统的生物、血液相容性,减低炎症反应,降低血液破坏,减少术后并发症等,可降低心脏外科手术术后住院率和死亡率,为人工心肺支持装置的推广应用提供了基础和条件,改善了病人的预后。而目前我国国内尚没有自行生产的肝素涂层管路,临床治疗中的需要依赖进口,但使用费用昂贵,限制体外循环的应用,也限制了我国大量的患者的救治。而本实验即是以研究适用于我们所需的涂层管为目标,进行的肝素涂层技术的基础研究及筛选工作。并加以创新。目的:筛选自主研制的肝素-地塞米松磷酸钠复合涂层管路最佳方法,筛选涂层方法的最佳参数条件,并对管路的效果进行初步的检测。方法:根据海藻酸钠、聚乙烯醇、壳聚糖具有的良好生物相容性、生物粘着性、安全性、水溶性、包裹小分子物质、缓释和聚电解质等特性,将PVC管道内表面用钙离子修饰,利用海藻酸钠易与二价阳离子交联形成网状聚合物的特点,制备海藻酸钠-肝素-地塞米松、海藻酸钠-聚乙烯醇-肝素-地塞米松、海藻酸钠-壳聚糖-肝素-地塞米松三种复合涂层材料,对三种涂层材料进行肝素涂层量、地塞米松磷酸钠包裹量、稳定性、红外光谱表征、透明度的检测对比,选择出最佳的涂层方法;然后对选择出的最佳的涂层方法进行反应条件的最优化选择;最后进行初步的抗凝血实验、蛋白吸附试验、电镜表现来初步检测管路的应用效果。结果:制备三种肝素涂层管道,分别为海藻酸钠-肝素-地塞米松复合涂层管道、海藻酸钠-聚乙烯醇-肝素-地塞米松复合涂层管道、海藻酸钠-壳聚糖-肝素-地塞米松复合涂层管道三种肝素涂层管道,并分别对三种肝素涂层管道的内表面肝素含量、涂层地塞米松含量、透明度、红外光谱分析、稳定性等方面进行测定和检测。根据结果,提示三种涂层方案均成功,再根据对比的各项指标,其中,三种肝素涂层方法的管道内表面肝素含量、地塞米松含量及红外光谱分析无显著差异:海藻酸钠-肝素-地塞米松复合涂层管道和海藻酸钠-壳聚糖-肝素-地塞米松磷酸钠复合涂层管道的透明度较好,海藻酸钠-聚乙烯醇-肝素-地塞米松复合层管道透明度较差;海藻酸钠-肝素-地塞米松复合涂层管道的稳定性最佳,海藻酸钠-聚乙烯醇-肝素-地塞米松复合层管道稳定性次之,海藻酸钠-壳聚糖-肝素-地塞米松复合涂层管道稳定性最差,因此综合比较各指标,可筛选出海藻酸钠-肝素-地塞米松磷酸钠复合缓释涂层管道为最佳的涂层管道,即海藻酸钠交联肝素法为最佳的肝素涂层方法。制备在不同稳定、反应时间及混合与否等条件下海藻酸钠-肝素-地塞米松涂层管路,并分别进行肝素结合量,包裹地塞米量,透明度,选择最佳的条件为45℃下海藻酸钠+肝素+地塞米松磷酸钠混合反应6h。制备最佳条件下海藻酸钠-肝素-地塞米松、海藻酸钠-肝素涂层管路,对照普通PVC管路,比较电镜表现,凝血实验,蛋白吸附试验等初步检测效果,电镜下涂层管路反应温和,并没有明显破坏管道的物理特性,凝血试验中单涂层和双涂层均可显著增加凝血时间,抗凝效果提示均良好,而对照普通PVC管路两种涂层均可降低血浆蛋白的吸附量,而二者无明显差异。结论:在我们自主预设的三种肝素涂层方法中,三种方案均涂层成功,其中以海藻酸钠-肝素-地塞米松复合涂层方法为最佳方法,而其反应的最佳条件为45℃下海藻酸钠+肝素+地塞米松磷酸钠混合反应6h,初步检测抗凝效果良好、蛋白吸附较普通PVC明显减少,而肝素单涂层较肝素+地塞米松双涂层无明显差异。
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