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目的:（1）野葛根的化学成分研究,（2）分子水平筛选和细胞水平筛选相结合筛选具有降糖活性的中草药,（3）超滤质谱耦合分子网络发现具有抑制PTP1B活性中草药的抑制PTP1B的活性成分。方法:（1）采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等方法进行分离纯化野葛根中的化学成分,1D及2D核磁共振、质谱、圆二色谱法鉴定所得到化合物结构。（2）采用体外活性检测方法对野葛根中分离出的新化合物及中草药提取物进行PTP1B体外抑制活性的测定,并采用细胞实验探究具有PTP1B抑制活性的提取物对胰岛素抵抗模型Hep G2细胞和3T3-L1细胞的糖消耗量的影响。（3）采用超滤质谱耦合分子网络方法发现具有抑制PTP1B活性中草药的抑制PTP1B的活性成分。结果:1.从野葛根中分离纯化得到39个化合物,分别鉴定为刺芒柄花素（formononetin,1）、大豆苷元（daidzein,2）、3′-羟基-大豆苷元（3′-hydroxy daidzein,3）、染料木素（genistein,4）、毛蕊异黄酮（calycosin,5）、7,2′,4′-三羟基异黄酮（7,2′,4′-trihydroxyisoflavone,6）、印度黄檀苷（sissotrin,7）、染料木苷（genistin,8）、葛根素（puerarin,9）、芒柄花苷（ononin,10）、6′′-O-乙酰大豆苷（6′′-O-acetyldaidzin,11）、大豆苷（daidzin,12）、葛根素-4′-O-葡萄糖苷（puerarin-4′-O-glucoside,13）、6′′-巴豆酰大豆苷（6′′-crotonyldaidzin,14）、8-C-β-D-glucopyranosyl-4′,7-dihydroxy-3′-methoxyisoflavone 4′-O-β-D glucopyranoside（15）、澳白檀苷（lanceolarin,16）、大豆苷元-8-C-芹菜糖（1→6）葡萄糖苷[daidzein 8-Capiosyl（1→6）glucoside,17]、染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-（1→6）-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（ambocin,18）、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（calycosin-7-O-β-Dglucoside,19）、葛根素-6′′-O-木糖苷（puerarin-6′′-O-xyloside,20）、3′-羟基葛根素（3′-hydroxypuerarin,21）、formononetin-8-C-β-D-apiofuranosyl-（1→6）-O-β-Dglucopyranoside（22）、formononetin-8-C-β-D-xylopyranosyl-（1→6）-O-β-Dglucopyranoside（23）、芒柄花素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷[formononetin 7-O-β-D-apiofuranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranoside,24]、3′-甲氧基葛根素（3′-methoxypuerarin,25）、liquiritigenin 7-methyl ether（26）、β-鹰嘴豆醇[β-garbanzol,27]、甘草素（liquiritigenin,28）、异甘草素（isoliquiritigenin,29）、葛酚苷元B（puerol B,30）、葛酚苷元A（puerol A,31）、kuzubutenolide A（32）、葛酚苷B（pueroside B,33）、（4R）-6′′′′-O-sinapoyl-pueroside B（34）、asphodelin A（35）、3-（3,4-dimethoxy-2-hydroxy-phenyl）-7-hydroxycoumarin（36）、丁香酸（syringic acid,37）、丁香醛（syringaldehyde,38）、对羟基苯甲酸乙酯（ethyl p-hydroxybenzoate,39）。其中有29个黄酮类化合物,5个葛酚苷类化合物,2个香豆素类化合物,3个其他类化合物。化合物16、19、35、36和37为首次从葛属植物中分离得到,化合物14和18为首次从该植物中分离得到,化合物34为一个新的葛酚苷类化合物。2.体外PTP1B抑制活性测定结果表明:与阳性药相比中草药提取物YS Fr2、YS Fr3、YSFr4、HC Fr2、DY Fr A、DY Fr B、DY C-（3-4）、JF Fr B、20-1、20-2、20-3、20-4、20-6具有明显PTP1B抑制活性即最大抑制率均大于50%,它们的IC50值远小于阳性药;化合物34、HC Fr1、DY D-3和20-5在测定条件下对PTP1B的抑制活性较弱,抑制率小于50%。中草药提取物对IR细胞影响中发现胰岛素抵抗（IR）Hep G2细胞组的相对葡萄糖消耗量相对Hep G2正常细胞组降低31.65%,但差异无统计学意义（P＞0.05）;各中草药提取物组与Hep G2胰岛素抵抗细胞组相比给药24 h后相对葡萄糖消耗量提高,差异无统计学意义（P＞0.05）。3T3-L1正常细胞组、20-3 50μg/m L组和DY Fr B 50μg/m L组与胰岛素抵抗（IR）3T3-L1细胞组相比相对葡萄糖消耗量明显提高（P＜0.01）,其他提取物组与胰岛素抵抗（IR）3T3-L1细胞组相比给药24 h后相对葡萄糖消耗量提高,但差异无统计学意义（P＞0.05）。3.超滤质谱结果显示中草药提取物中含有多种成分,其中YS Fr2空白对照组、样品组和变性对照组的分离度较好,各个成分基本能分离开来,但YS Fr2样品组中的色谱峰较少,YS Fr4的分离效果相对较差,YS Fr4样品组中的色谱峰较多;分子网络结果显示从YS Fr2中未筛选出PTP1B抑制剂,从YS Fr4中筛选出了具有PTP1B抑制作用的准分子离子分别为[M+H]+336.325和349.236的化合物。结论:1.从野葛根中分离出39个化合物,主要为黄酮类及葛酚苷类化合物,其中有1个新化合物,5个属首分及2个植物首分化合物,对野葛药理作用的研究有借鉴作用。2.发现13个提取物具有明显的PTP1B抑制活性,2个提取物可增加胰岛素抵抗3T3-L1细胞的相对葡萄糖消耗量（P＜0.01）。3.超滤质谱耦合分子网络可从中草药提取物中筛选出[M+H]+为336.325和349.236的抑制PTP1B的成分,超滤质谱与分子网络相结合大大缩短了从复杂中草药中筛选及鉴定活性成分的时间。