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冬虫夏草是我国名贵的药用真菌,与人参、鹿茸并称为中药三大补品。目前,天然虫草已濒临灭绝。大量研究表明,蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉在化学成份、药理作用及临床效果上与天然虫草基本一致。而且蝙蝠蛾拟青霉是国家允许使用的可药食两用的真菌菌种。
本报告以蝙蝠蛾拟青霉CS10为试验菌株,对摇瓶发酵培养基配方和发酵条件进行了优化,并进行扩大培养。研究结果如下:
最佳发酵培养基配方:蔗糖4%豆饼粉4%KH2PO40.15%MgSO40.1%
最佳摇瓶发酵条件:初始pH6.5,装液量100mL/500mL,种龄为36h,接种量为5%,温度为25℃,摇床转速170r/min。菌丝体收率为40.12g/L。与原配方比,菌丝体收率提高了31.75%。
最佳发酵罐发酵条件:通风量1:0.75(V/V.min),10L发酵罐装料量为8L,,搅拌速率200r/min。通过在发酵过程中流加4mol/L的NaOH和2mol/L的HCL将pH分别控制在6.0、6.5、7.0,当pH=6.5时菌丝体收率最高为34.78g/L,同不控制发酵pH相比,菌丝体收率增长了13%。
蝙蝠蛾拟青霉菌丝粉主要是水煎煮处理,缺点是剂量大,有效成份损失,质量控制也存在缺陷,本报告采用水浸提法、酶法、超声波法和超微粉技术对菌粉进行处理,目的是找到一种提高虫草发酵产品质量的提取工艺。研究结果如下:
水浸提法最佳提取工艺:菌粉:水=1:10,浸提2h,浸提2次,浸提温度70℃,甘露醇含量11.2%,腺苷含量1670μg/g。
酶法提取的最佳工艺:浸提pH5.5,浸提温度40℃,最佳酶组合:纤维素酶0.1%+蜗牛酶0.1%,甘露醇含量12.56%,腺苷含量2065μg/g。
超声波法最佳提取条件:超声波功率250W,作用10min,作用方式:处理60s,间歇10s,浸提pH5.0,甘露醇含量10.56%,腺苷含量1670μg/g。
超微粉甘露醇含量11.76%,腺苷含量2970μg/g,与未处理菌粉相比分别提高了16%和70%。
结论:酶法提取的甘露醇和腺苷含量最高,而且处理温度低,耗能少,节约能源,并且可连续进行处理,单次处理数量大,处理时间短。超微粉提取效果也比较好,但处理成本高,时间长。
另外,据文献报道,冬虫夏草发酵液中可能含有某种抑菌物质,具有抗菌、抗肿瘤等作用。本研究对蝙蝠蛾拟青霉菌丝体及过滤废液中抑菌活性物质进行了初步研究,结果表明:
蝙蝠蛾拟青霉菌丝体对金黄色葡萄球菌有抑制作用,抑菌圈直径为20mm。浓缩20倍的过滤废液对大多数细菌都有拮抗作用,对酵母菌、丝状真菌没有抗菌活性。