【摘 要】
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目的:探究HO-1修饰BMSC治疗大鼠无心跳体肺移植IRI的保护机制。方法:首先,以SD大鼠构建NHBD肺移植IRI的动物模型,以此来模拟临床NHBD肺移植IRI的情况,并以HO-1为目的基因通过慢病毒为载体来修饰BMSC,构建HO-1-BMSC,然后以肺动脉细针穿刺法将HO-1-BMSC注入受体。设立手术对照(Ⅰ组)、单纯BMSC(Ⅱ组)、慢病毒空载体-BMSC(Ⅲ组),HO-1修饰BMSC(Ⅳ
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目的:探究HO-1修饰BMSC治疗大鼠无心跳体肺移植IRI的保护机制。方法:首先,以SD大鼠构建NHBD肺移植IRI的动物模型,以此来模拟临床NHBD肺移植IRI的情况,并以HO-1为目的基因通过慢病毒为载体来修饰BMSC,构建HO-1-BMSC,然后以肺动脉细针穿刺法将HO-1-BMSC注入受体。设立手术对照（Ⅰ组）、单纯BMSC（Ⅱ组）、慢病毒空载体-BMSC（Ⅲ组）,HO-1修饰BMSC（Ⅳ组）;每组n=15,在4℃低温下用LPDG保存液冲洗无心跳供体,以此清除肺内残留的微血栓,之后在LPDG液中低温存放1h;采用三袖套技术将NHBD植入受体左胸腔;左肺移植成功后Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别经受鼠肺动脉细针注入RFP标记的单纯BMSC、慢病毒空载体-BMSC、HO-1-BMSC。移植成功后4 h,在夹闭右侧肺门5min后采集标本。经腹主动脉抽1ml血用血气仪测量PaO2、PaCO2。从受体下腔静脉采血行ELISA检测,了解其中TNF-α、IL-10的表达程度。测量移植物的湿/干比率;测量移植物中SOD的活性、MDA和MPO的含量;HE染色后看组织的病理生理学改变;RT-PCR和Western-blot检测移植物中HO-1的表达水平;检测移植物中RFP标记的BMSC的定植分布情况。结果:Ⅳ组>Ⅱ及Ⅲ组>Ⅰ组:PaCO2降低、移植物湿-干比重降低、PaO2升高（P<0.05）;MDA和MPO含量降低、SOD活性增强（P<0.05）;TNF-α表达减弱,IL-10表达增强（P<0.05）。光镜下见中性粒细胞浸润肺间质,肺泡腔内见炎性渗出,各组中以Ⅳ组炎症改变最轻;Ⅳ组的HO-1表达水平明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组（p<0.05）;荧光镜下观察移植物中BMSC的定植主要分布在肺泡壁上。结论:HO-1基因修饰BMSC在治疗无心跳供体肺移植IRI中两者具有协同抗损伤作用,为临床解决NHBD肺移植,甚至其他移植的治疗提供一条全新的思路。
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