癌胚抗原传感检测方法的研究

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癌症是全世界危及人类生命的重大疾病之一,对于癌症的预防、筛查和治疗是全球乃至我国在重大疾病方面面临的首要任务。早期诊断和治疗能有效提高患者的生存率,所以设计构建一种快速、准确和简便检测方法对癌症标志物进行定量分析尤为重要。本文研究基于生物敏感元件、纳米材料的优良特性,构建性能良好的磁弹性生物传感器和电化学生物传感器,用于检测癌胚抗原(CEA),研究的目的主要是分析不同敏感探针对癌胚抗原的检测效果,为临床的应用检测提供新的方法。本论文具体研究内容及思路如下:首先,基于抗体免疫分析法和磁致伸缩材料的共振特性,设计制备了磁弹性抗体传感器。采用抗体-抗原的特异性结合原理,CEA抗体作为敏感单元,将抗体负载于磁弹性传感器表面,牛血清蛋白(BSA)不仅避免非特异性吸附,而且还可以减少抗体与抗体之间的空间位阻效应。采用原子力显微镜(AFM)和扫描电子显微镜(SEM)对不用修饰过程以及检测过程的微观形貌表征,利用荧光显微对FITC标记的癌胚抗原抗体(FITC/Anti-CEA)进行荧光表征,实现对抗体浓度的优化,最后完成对癌胚抗原的定量检测。然后,基于适配体特异性免疫法,采用巯基化的适配体作为敏感单元,通过自组装法负载于磁弹性传感器表面,制备了一种新型的磁弹性适配体传感器。利用6-巯基-1-己醇(MCH)减少免疫传感器的非特异性吸附以及避免适配体之间的空间位阻效应。采用AFM和SEM对传感器表面微观形貌进行表征,以及对不同修饰过程以及检测过程的元素进行分析。对实验条件进行优化,磁弹性适配体传感器实现了癌胚抗原的定量检测。最后,采用柠檬酸钠和单宁酸联合还原氯金酸制备金纳米颗粒(AuNPs),并与羧基化的多壁碳纳米管制备成AuNPs/MWCNTs复合物,对MWCNTs、AuNPs/MWCNTs进行SEM形貌表征、EDS分析以及CV电学特性表征,同时对纳米材料以及适配体浓度进行了优化,在最优的实验条件下,制备好的电化学免疫传感器对癌胚抗原定量检测。
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