鞘内注射盐酸奈福泮和新斯的明的镇痛作用及其相互作用的研究

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目的:观察鞘内联合应用盐酸奈福泮和新斯的明对切口疼痛大鼠模型的痛行为及对脊髓c-fos蛋白表达的影响,研究它们镇痛作用的机制及在脊髓水平药物之间的相互作用。方法:在大鼠切口疼痛模型上结合鞘内置管技术,采用累积疼痛评分法评定大鼠疼痛行为;采用序贯法分别使用不同剂量奈福泮、新斯的明进行鞘内注射(IT)以获得量效曲线及半效剂量(ED50),IT联合应用不同比例的ED50剂量以观察联合用药时药物各自的半效剂量;运用免疫组化技术观察奈福泮、新斯的明及联合应用时对脊髓背角c-los基因表达的影响。结果:(1)采用序贯法据公式求出鞘内注射50~150μg的奈福泮的ED50值为82.64μg,95%可信区间为(72.53~94.14)μg;鞘内注射剂量1~10μg的新斯的明的ED50值为8.36μg,95%可信区间为(6.68~10.70)μg;鞘内合用1/2ED50、1/4ED50、1/8ED50、1/16ED50的新斯的明和奈福泮的ED50值分别为:奈福泮10.93μg,95%可信区间(6.83~17.49)μg;新斯的明1.05μg,95%可信区间为(0.66~1.68)μg。(2)与对照组相比,术后鞘内注射Nfp组、Neo组及合用组均可明显降低累积疼痛评分(P<0.01),各用药组之间无显著性差异。奈福泮和新斯的明单独应用及联合应用对切口疼痛大鼠均产牛剂量依赖型的镇痛作用。(3)据Tallarida等提出的Isobologram作图方法,从以上求出的两药单独使用时的ED50和合用时的ED50,得出图5,从图5可知新斯的明和奈福泮的相互作用是协同的.(4)新斯的明和奈福泮ED50量单独使用时均明显抑制c-fos蛋白的表达,而1/2 ED50两药的合用,抑制程度更大。它们的作用主要产生在Ⅰ-Ⅱ层、Ⅴ-Ⅵ层,以Ⅰ-Ⅱ层分布最多。(5)ED50量的奈福泮对脊髓Ⅰ-Ⅱ层的FLI-N的抑制率为41.5%,对Ⅴ-Ⅵ层的抑制率为34.2%,ED50量的新斯的明对脊髓Ⅰ-Ⅱ层的FLI-N的抑制率为31.9%,对Ⅴ-Ⅵ层的抑制率为30.6%,1/2ED50量的奈福泮和新斯的明合用时,对脊髓Ⅰ-Ⅱ层的FLI-N的抑制率为83.4%,对Ⅴ-Ⅵ层的抑制率为75.5%。根据Berenbaum的方法,说明两药对FLI-N的抑制作用是协同的。(6)c-fos表达强度与动物行为学呈正的直线相关结论:(1)盐酸奈福泮50~150μg、新斯的明5~15μg鞘内应用均可产牛剂量依赖性的抗伤害作用。(2)鞘内注射盐酸奈福泮和新斯的明的抗伤害作用与抑制c-fos蛋白的表达有关。(3)在脊髓水平上,盐酸奈福泮和新斯的明的抗伤害作用存在协同作用;盐酸奈福泮与新斯的明对c-fos抑制作用亦有协同效应。
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